以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Lck抑制劑(Lck Inhibitor) | Lck Inhibitor | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
Lck Inhibitor是新型的Lck抑制劑,IC50為7nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):847950-09-8 純度:98.29% 分子量:530.62 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
葡萄穗霉卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白102B抗體Human SBDP 120(Alpha II SPECTRIN BREAKDOWN PRODUCT 120) ELISA Kit人血栓A2(TX-A2)免疫試劑盒
球黑孢霉卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白16抗體Human SBDP 150(Alpha II SPECTRIN BREAKDOWN PRODUCT) ELISA Kit人血栓前體蛋白(TpP)免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌色B還原1抗體Human α-GST(α-glutathione S-transferases) ELISA Kit人血清淀粉樣蛋白P(SAP)免疫試劑盒
球形賴(lài)芽孢桿菌2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框76抗體Human SBDP 145(Alpha II SPECTRIN BREAKDOWN PRODUCT) ELISA Kit人血清淀粉樣蛋白A4(SAA4)免疫試劑盒
枇杷假尾孢3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框19抗體Human PI3K(Phosphotylinosital 3 Kinase) ELISA Kit人血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)免疫試劑盒
辣乳菇色c氧化5A抗體Human FBXO32(F-box only protein 32) ELISA Kit人血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白60抗體Human PIF/DCD(Proteolysis Inducing Factor/Dermcidin) ELISA Kit人血清剝奪反應(yīng)相關(guān)蛋白(SDPR)免疫試劑盒
白色姜成林氏菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白144A抗體Human PGE2(Prostaglandin E2) ELISA Kit人血清/糖皮質(zhì)激調(diào)節(jié)激2(SGK2)免疫試劑盒
矮棒曲霉周期B3抗體Human STK(serine/threonine protein kinase) ELISA Kit人血漿抗凝蛋白S(PS)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌羧肽X(M14家族2)抗體Human GAGs(Glycosaminoglycan) ELISA Kit人血漿激肽釋放(KLKB1)免疫試劑盒
條紋雞樅上皮鈣粘附分子結(jié)合蛋白E7Human CLPB/HSP78(Caseinolytic peptidase B protein homolog) ELISA Kit人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)免疫試劑盒
擬青霉周期D結(jié)合蛋白1抗體Human NXPE4(NXPE family member 4) ELISA Kit人血紅氧合2(HO-2)免疫試劑盒
泛菌屬卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白120抗體Human KEAP1(kelch-like ECH-associated protein 1) ELISA Kit人血紅氧合1(HO-1)免疫試劑盒
擲抱酵母卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白23抗體Human NGFR(p75 neurotrophin receptor) ELISA Kit人血紅蛋白β亞基(HB-β)免疫試劑盒
黑木耳(植5)卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白89抗體Human RAMP1(Receptor activity-modifying protein 1) ELISA Kit人血紅蛋白α亞基(HB-α)免疫試劑盒
釀酒酵母卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白30抗體Human STATH(Statherin) ELISA Kit人血紅蛋白H(HbH)免疫試劑盒
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRFc受體樣蛋白3試劑盒黑芥子硫苷一
嗜菌Acidiphilium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRFAM172A蛋白試劑盒黃腐酚
球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRE選擇試劑盒華蟾它靈
Lck抑制劑(Lck Inhibitor)1,4,7-三基-1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二...英文名稱(chēng): Coronene一種腫瘤抑制基因抗體(N端)包裝5g
1-(6-Chloro-9H-咔唑-2-yl)乙?;?...英文名稱(chēng): Coronene (purified by sublimation)腺苷單磷活化蛋白激α1/AMPK α 1抗體包裝1g
1-β-D-呋核亞硝尿-1,2,4-三唑-3-羧酯英文名稱(chēng): Corannulene維生K依賴(lài)的蛋白C重鏈抗體包裝5g
1-含氧的布洛芬英文名稱(chēng): 2,5-Diphenyl-1,3,4-oxadiazole神經(jīng)叢蛋白A1抗體包裝1g
1-基-煙?;镉⑽拿Q(chēng): 2,5-Di(1-naphthyl)-1,3,4-oxadiazolep21激活激4抗體包裝25g
1-基英文名稱(chēng): 9,10-Di(1-naphthyl)anthracene磷化p21激活激4/5/6抗體包裝5g
1-基吲唑-3-羧(格拉司瓊雜質(zhì)D)英文名稱(chēng): 2,3,6,7,10,11-Hexakis(hexyloxy)triphenylene磷化p21激活激1/2抗體包裝100ml
1-萘乙酰精三鹽英文名稱(chēng): Perylene磷化p21激活激1/2抗體包裝25ml
1-羥基布洛芬(布洛芬雜質(zhì)))(非對(duì)映異構(gòu)體混合物)英文名稱(chēng): Perylene (purified by sublimation)磷化p21激活激2抗體包裝5ml
1-去 2-基格拉司瓊(格拉司瓊雜質(zhì)A)英文名稱(chēng): 1,1,4,4-Tetraphenyl-1,3-butadiene磷酯Cγ2抗體包裝10g
1-去 格拉司瓊(格拉司瓊雜質(zhì)B)英文名稱(chēng): Triphenylene磷化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-α抗體包裝50g
1-月桂酰-3-英文名稱(chēng): meso-Tetraphenylchlorin磷化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-α抗體包裝100g
10-反式-阿托伐他?。ò⑼蟹ニ‰s質(zhì)AT10)((3...英文名稱(chēng): Tetraphenylporphyrin (Chlorin free)P73腫瘤抑制基因抗體包裝25g
10-反式-阿托伐他汀縮合物叔丁基酯英文名稱(chēng): 2,4,6-Triphenyl-1,3,5-triazine表觀抑制因子Polycomb家族成員PCGFl蛋白抗體包裝25g
10-羥基華法林(非對(duì)映異構(gòu)體混合物)英文名稱(chēng): 1,3-Diphenyl-1,3-propanedioneG蛋白偶聯(lián)嘌呤受體p2y10抗體包裝5g