產品屬性:
中文名稱:mTOR激酶抑制劑(CC-223)
英文名稱:CC-223
產品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
CC-223是一種有效的mTOR激酶抑制劑(IC50=16nM),比作用于相關脂質激酶PI3Kα(IC50=4μM)選擇性高150倍。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1228013-30-6 純度:98.75% 分子量:397.47 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
泡盛曲霉熒光Cy3標記小鼠IgG(流式同型對照)Anti-IL37 Antibody人S100鈣結合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)
大腸埃希氏菌熒光Cy3標記羊IgG(流式同型對照)Anti-IL6 Antibody人S100鈣結合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)
玫瑰菌核鏈霉菌熒光Cy3標記大鼠IgG(流式同型對照)Anti-ILF3 Antibody人S100鈣結合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)
墳墓節(jié)桿菌熒光Cy3標記牛IgGAnti-IL9R Antibody人S100鈣結合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)
假絲酵母屬熒光Cy3標記牛IgMAnti-INA1 Antibody人前病整合位點1(Pim1)
戴爾根霉熒光Cy3標記雞IgGAnti-IL6 Antibody人前病整合位點1(Pim1)
花土溝游動微菌熒光Cy3標記雞IgMAnti-ILKAP Antibody人綠膿桿菌外A(PEA)
弗雷德里克斯堡假單胞菌熒光Cy3標記狗IgGAnti-ING1 Antibody人綠膿桿菌外A(PEA)
沃特曼籃狀菌熒光Cy3標記羊IgMAnti-ING4 Antibody人流感病A(FLU A)
半園田頭菇熒光Cy3標記豚鼠IgGAnti-ING3 Antibody人流感病A(FLU A)
彩色豆馬勃熒光Cy3標記豚鼠IgMAnti-ING4 Antibody人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)
根瘤菌熒光Cy3標記馬IgGAnti-ING5 Antibody人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)
大腸埃希氏菌熒光Cy3標記馬IgMAnti-INHBA Antibody人抗乙型肝炎病核心抗體(HBcAb)
污水土地桿菌熒光Cy3標記人IgGAnti-INHBB Antibody人抗乙型肝炎病核心抗體(HBcAb)
多主葡萄殼菌熒光Cy3標記人IgMAnti-INHBE Antibody人抗乙型肝炎病核心IgM抗體(HBcAb-IgM)
黑木耳熒光Cy3標記人IgAAnti-INHBC Antibody人抗乙型肝炎病核心IgM抗體(HBcAb-IgM)
Ras樣蛋白B抗體謝瓦曲霉人肺微血管內皮細胞
視網膜母細胞瘤結合蛋白5抗體鹿皮色曲霉小鼠骨樣細胞
原癌基因相關蛋白RAP2B抗體炭黑曲霉人脂肪間充質干細胞
環(huán)指蛋白6抗體泡盛曲霉煙色變種人套細胞淋巴瘤
mTOR激酶抑制劑(CC-223)鏈霉 Rubelloside B
產氣莢膜梭 B型 長壽花糖甙
外海橄欖形 槐雙氫黃酮
蜂蜜接合酵母 Rivulobirin E
假密環(huán) 槲皮-3-D-木糖甙
球色單隔孢屬 Randaiol
深酒紅短鏈游動 Rabdoketone B
瑞士乳桿 R(+)-戈米辛 M1
蘋果鏈格孢 3-O-beta-D-葡糖苷雞納酸酯
巨大芽孢桿 Quinamine
米黑根毛霉 Pyrroside B
耐冷冷桿 Putraflavone
火雞皰疹病(+)陽性血清 Pseudopalmatine
構巢裸胞殼 Przewaquinone A
解脂假絲酵母解脂變種 紫丹參萜
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)