產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Lck激酶抑制劑(AMG-47a)
英文名稱:AMG-47a
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
AMG-47a是Lck激酶抑制劑,能抑制T細(xì)胞增殖。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):882663-88-9 純度:98.78% 分子量:535.56 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
釀酒酵母鈣平衡調(diào)節(jié)蛋白1抗體Human ITGA1/CD49a(Integrin alpha-1) ELISA Kit人血小板生長因子(PGF)免疫試劑盒
傳染性支氣管炎病阿爾茨海默病淀粉樣蛋白相關(guān)膠原蛋白抗體Human NKp44/NCR2(Natural cytotoxicity triggering receptor 2) ELISA Kit人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)免疫試劑盒
莫拉卡他莫拉菌老年癡呆相關(guān)類鈣粘蛋白CS1抗體Human NKp46/NCR1(Natural cytotoxicity triggering receptor 1) ELISA Kit人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)免疫試劑盒
Pseudomonas 凋亡誘導(dǎo)蛋白NALP3抗體Human Cavin 1(Polymerase I and transcript release factor) ELISA Kit人血小板激活因子乙酰水解2,質(zhì)(PAFAH2)免疫試劑盒
黃硬皮馬勃豬圓環(huán)病Ⅱ型衣殼蛋白抗體Human NKp30/NCR3(Natural cytotoxicity triggering receptor 3) ELISA Kit人血小板活化因子(PAF)免疫試劑盒
鍺栓孔菌血管加壓激活鈣啟動(dòng)受體蛋白1抗體Human INT8(IntegRator complex subunit 8) ELISA Kit人血小板反應(yīng)蛋白/凝血敏感蛋白1(TSP-1)免疫試劑盒
圍小叢殼干生長因子受體/表面分化抗原抗體Human CAMP(Cathelicidin Antimicrobial Peptide) ELISA Kit人血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)免疫試劑盒
東方擬無枝菌氯離子通道蛋白6抗體Human INT6(IntegRator complex subunit 6) ELISA Kit人血纖肽/纖維蛋白肽A(FPA)免疫試劑盒
粟酒裂殖酵母殺菌肽B/天蠶抗菌肽B抗體Human RF-IgA(Rheumatoid Factor IgA) ELISA Kit人血纖蛋白原γ鏈(FGG)免疫試劑盒
鞘單胞菌碳酐13抗體Human PAX-8(Paired box protein pax-8) ELISA Kit人血纖蛋白(Fibrin)免疫試劑盒
蜂房哈夫尼菌氯離子通道蛋白5抗體Human RF-IgM(Rheumatoid Factor IgM) ELISA Kit人血吸蟲抗原免疫試劑盒
食菌屬(噬菌屬)軸突相關(guān)粘附分子抗體Human SSB(Lupus La protein) ELISA Kit人血吸蟲抗體(IgM)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD1抗體Human SSA(Sjogren syndrome antigen A) ELISA Kit人血吸蟲抗體(IgG)免疫試劑盒
細(xì)交鏈孢霉ATP依賴的解旋CHD3抗體Human KEAP1(kelch-like ECH-associated protein 1) ELISA Kit人血吸蟲(SH)抗體免疫試劑盒
產(chǎn)芽孢梭菌(生孢梭菌)碳酐7抗體Human Acetylated HB(Acetylated Hemoglobin) ELISA Kit人血栓B2(TXB2)免疫試劑盒
新疆糖單孢菌膠原蛋白和鈣結(jié)合表皮生長因子結(jié)構(gòu)域1抗體Human SP(Substance P) ELISA Kit人血栓A2合成(TX-A2)免疫試劑盒
寬松環(huán)單頂孢Monacrosporium│lysipagum 質(zhì)量規(guī)格:BSFOS 樣抗原2試劑盒決明
豬布魯氏菌Brucella│suis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRFMS樣酪激3配體試劑盒紅景天
暗球腔菌Phaeosphaeria│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級(jí)FMS樣酪激3試劑盒
Lck激酶抑制劑(AMG-47a)(S)-鹽氮卓斯汀英文名稱: 9,9-Dimethyl-9H-9-silafluorene平足蛋白抗體(管內(nèi)皮蛋白)包裝1g
(S)-鹽英文名稱: 2,7-Dibromophenanthrene-9,10-dione蛋白磷酯-1B抗體包裝5g
(S)-鹽樂卡地平英文名稱: Naphthalene-1,4,5,8-tetracarboxylic Dianhydride蛋白質(zhì)磷-2A抗體包裝10g
(Z)-4-羥基它莫西芬英文名稱: 1,4,5,8-Naphthalenetetracarboxdiimide磷酯-2Ac抗體包裝50g
(±)-吡格雷鹽鹽英文名稱: 3,4,9,10-Perylenetetracarboxylic Diimide磷化-絲裂原活化蛋白激p38抗體(P-p38 MAPK)包裝1g
(±)-柚皮英文名稱: SelenopheneD型-過氧化活化增生受體抗體包裝250mg
(α/β)-1-氧基英文名稱: 2,2',7,7'-Tetrabromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene]過氧化活化增生受體γ抗體(PPARγ)包裝100ml
(順式)伏沙明英文名稱: 1,3,6,8-Tetrabromopyrene孕受體抗體包裝25ml
1'-Epi 鹽吉西他濱英文名稱: 2,2',7,7'-Tetrabromo-9,9'-bifluorenylidene脯羥化抗體包裝500ml
1'-Epi吉西他濱'-Dibenzoate英文名稱: Copper(II) Phthalocyanine (α-form)早老蛋白-1抗體包裝1g
1,1'-[(1-基乙基)亞基]二[3-[4-(2...英文名稱: Copper(II) Phthalocyanine (β-form)早老蛋白-1抗體包裝5g
1,2-二月桂酰-sn-甘油-3-膽堿磷英文名稱: Tris(1,3-diphenyl-1,3-propanedionato)(1,10-phenanthroline)europium(III)早老蛋白-1抗體包裝100mg
1,3-二-(o-叔丁基二基硅烷)-Fmoc-D-赤...英文名稱: 3-(2-Benzothiazolyl)-7-(diethylamino)coumarin前列腺干抗原抗體包裝1g
1,3-二(芐氧基)-5-尿嘧啶英文名稱: 3-(2-Benzimidazolyl)-7-(diethylamino)coumarin突觸后密度蛋白95抗體包裝5g
1,3-二芐基-5-尿嘧啶英文名稱: 4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene (purified by sublimation)P選擇抗體包裝1g
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)