嘧啶合成抑制劑(Leflunomide)公司*的產(chǎn)品：PABA(Human para-aminobenzoic acid) ELISA Kit 人對氨苯氧化釔 99.999% metals basis
LPA(Human L-phenylalanine) ELISA Kit 人苯氨氧化釔 99.99% metals basis ,50nm
Irna(Human Immune RNA) E

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：嘧啶合成抑制劑(Leflunomide)

英文名稱：Leflunomide

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|50mg|100mg|500mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

乳乳球菌RAS癌基因相關(guān)蛋白Rab6C抗體Anti-CXCL3 Antibody脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(CETP)

香魚假單胞菌RAP1GAP激活蛋白抗體Anti-CXCL2 Antibody脂質(zhì)運(yùn)載蛋白9(LCN9)

博伊丁酵母原癌基因酪蛋白激受體RET/多發(fā)性內(nèi)分泌腺瘤和甲狀腺髓樣癌蛋白抗體Anti-CXCL16 Antibody脂質(zhì)運(yùn)載蛋白8(LCN8)

拉曼被孢霉磷化原癌基因酪蛋白激受體RET抗體Anti-CXCL5 Antibody脂質(zhì)運(yùn)載蛋白6(LCN6)

馬克斯克魯維酵母馬克斯變種G蛋白家族RAB21蛋白抗體Anti-CXCL9 Antibody脂質(zhì)運(yùn)載蛋白15(LCN15)

貝氏不動桿菌泛結(jié)合蛋白P62抗體Anti-CXCL8 Antibody脂質(zhì)運(yùn)載蛋白12(LCN12)

蛹蟲草Rap2A抗體Anti-CXCL8 Antibody脂質(zhì)運(yùn)載蛋白10(LCN10)

粉狀畢赤酵母胰島β生長因子Reg IIIγ抗體Anti-CXCR1 Antibody脂質(zhì)運(yùn)載蛋白1(LCN1)

爪哇根霉胰島β生長因子Reg IIIα 抗體Anti-CXCL9 Antibody脂3(LPIN3)

假單胞菌核糖體蛋白S6修飾樣蛋白A抗體Anti-CXCR2 Antibody脂2(LPIN2)

變幻青霉RFTN2蛋白抗體Anti-CXCR2 Antibody脂1(LPIN1)

蒙古鹽單胞菌環(huán)指蛋白213Anti-CXCR2 Antibody脂生蛋白(ADIG)

室內(nèi)外電子溫濕度計(jì)受體結(jié)合絲蘇激3抗體Anti-CXCR1 Antibody脂解激活脂蛋白受體(LSR)

堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌受體結(jié)合絲蘇激5抗體Anti-CXCR3 Antibody(PB0038)脂肪型脂肪結(jié)合蛋白(FABP4)

黃孢原毛平革菌RNA結(jié)合蛋白15抗體Anti-CXCR4 Antibody脂肪膜關(guān)聯(lián)蛋白(APMAP)

綠色木霉環(huán)指蛋白47抗體Anti-CXCR4 Antibody脂肪轉(zhuǎn)移2(LIPT2)

半裸鐮孢Fusarium│semitectum 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

日本蟲草廣東變型Cordyceps│japonica f. guangdongensis 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR

雞腿菇（毛頭鬼傘）Coprinus│comatus 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
嘧啶合成抑制劑(Leflunomide)鹽反硝化枝芽孢桿 MiddleBrook7H10瓊脂硫酸肝糖蛋白Elisa

匍匐曲霉原變種 MiddleBrook7H11瓊脂硫酸類肝Elisa

大豆慢生根瘤 曲霉瓊脂基礎(chǔ)(AFPA)硫酸軟骨Elisa

青色鏈霉 假單胞分離瓊脂卵磷脂Elisa

淡紫灰吸水鏈霉 knudson糜蛋白Elisa

釀酒酵母 TGE培養(yǎng)基球蛋白AElisa

 MMO-MUG培養(yǎng)基球蛋白EElisa

葡萄牙棒孢酵母 硫細(xì)培養(yǎng)基球蛋白GElisa

假單胞屬 GVPC瓊脂基礎(chǔ)球蛋白G1Elisa

栗酒裂殖酵母 霉培養(yǎng)基球蛋白G2Elisa

藤黃微球 ASS瓊脂球蛋白G2aElisa

乳酸片球 AC肉湯球蛋白G2bElisa

阿納托利亞正青霉 細(xì)L型增液球蛋白G3Elisa

核盤 細(xì)L型分離瓊脂球蛋白G4Elisa

平菇 溶血瓊脂基礎(chǔ)球蛋白MElisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)