Akt廣譜抑制劑(GDC-0068)公司*的產(chǎn)品：NGF- Beta(Human Nerve growth factor- Beta) ELISA kit 人的神經(jīng)生長(zhǎng)因子-β2-庚烷 99%
MIP-3 Beta/ELC/CCL19(Human Macrophage Inflammatory Protein-3 Beta) ELISA kit 人巨噬炎性蛋白3β6-氧-2-酰萘 98%

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：Akt廣譜抑制劑(GDC-0068)

英文名稱：GDC-0068

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

Bacillus 絲裂原活化蛋白激6抗體Human INSR(Insulin receptor) ELISA Kit生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因γ/黑瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)

釀酒酵母磷化絲/蘇蛋白激MST4,MST3,STK25抗體Human OSGEPL1 ELISA Kit生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因β/黑瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)

鏈格孢表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白Megf10抗體Human ORAI2 ELISA Kit生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因α/黑瘤生激因子(GROα/CXCL1/MGSA)

黃硬皮馬勃MPP4蛋白抗體Human OSGIN1 ELISA Kit生長(zhǎng)激釋放因子(GH-RF)

毛柄金錢菌(金針菇)微小染色體維持缺陷蛋白7抗體Human ORAI3 ELISA Kit生長(zhǎng)激釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)

狂犬病參考疫苗E3泛連接MUL1抗體Human ORC5L ELISA Kit生長(zhǎng)激釋放肽(Ghrelin)

巨型艾美耳球蟲(chóng)纖微絲相關(guān)糖蛋白2抗體Human ORC4L ELISA Kit生長(zhǎng)激釋放多肽(GHRP)

中國(guó)臺(tái)灣根霉肥大類糜蛋白1抗體Human OSR1 ELISA Kit生長(zhǎng)激結(jié)合蛋白(P)

黃赭色鏈霉菌甲硝唑單克抗體Human ORC6 ELISA Kit生長(zhǎng)激(HGH)

鴨疫里氏桿菌線粒體核糖體蛋白L12抗體Human OS9 ELISA Kit生長(zhǎng)激(GH)

膠孢線粒體核糖體蛋白L39Human OLFM3 ELISA Kit生長(zhǎng)分化因子-9(GDF-9)

枯草芽孢桿菌脫氫激1抗體Human OSBP ELISA Kit生長(zhǎng)分化因子9(GDF-9)

耐輻射薄層菌絲裂原活化的蛋白激p38β抗體Human OLIG2(Oligodendrocyte transcription factor 2) ELISA Kit生長(zhǎng)分化因子3(GDF3/UNQ222/PRO248)

多根硬皮馬勃核基質(zhì)蛋白3抗體Human OMCG1 ELISA Kit生長(zhǎng)分化因子2(GDF2)

鐮孢霉組織相容性復(fù)合體蛋白1抗體Human OMA1 ELISA Kit生長(zhǎng)分化因子15(GDF-15)

Chryseobacterium lathyri組織相容性復(fù)合體蛋白2抗體Human ONECUT2 ELISA Kit生長(zhǎng)分化因子15(GDF15)

AS3.1914資源名稱: 短柄帚霉 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)脫氧野尻霉

黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)蒿本內(nèi)酯

ATCC26921資源名稱: 里氏木霉 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(T)6-姜酚
Akt廣譜抑制劑(GDC-0068)黃曲霉 3,3-二甲基-1-雌受體Elisa

公州類諾卡氏 甲基環(huán)氧烷雌誘導(dǎo)蛋白Elisa

黑倚囊霉 4-甲氧基苯乙促卵泡Elisa

硫磺 木蠟酸促腎上皮質(zhì)釋放Elisa

蠟樣芽孢桿 6-(馬來(lái)酰亞基)己酸琥珀酰亞酯促腎上腺皮質(zhì)Elisa

林生毛霉 四丁基磷酸二氫銨催乳Elisa

腐皮殼屬 四丁基磷酸二氫銨蛋白多糖Elisa

無(wú) 5-溴間二甲苯多配體蛋白聚糖1Elisa

木霉屬 3-甲基-2--1-兒茶酚Elisa

薛瓦酵母 1,4-環(huán)己二兒茶酚抑Elisa

長(zhǎng)枝木霉 4-乙酰氨基高遷移率族蛋白B1Elisa

玉米乳桿 安塞蜜睪酮Elisa

根瘤 3-甲基-2-吡啶過(guò)氧化Elisa

煉乳假絲酵母 四羥甲基硫酸磷（THPS）核因子κBElisa

大腸埃希 3-呋喃酸(含不定量的酸酐)環(huán)氧合2Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)