商品介紹:
BMS-690514是有效,有的EGFR和VEGFR的有效抑制劑,對于EGFR,HER2和HER4的IC50值分別為5,9和60nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:859853-30-8 純度:99.37% 分子量:368.43 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:EGFR和VEGFR抑制劑(BMS-690514)
英文名稱:BMS-690514
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌大鼠水通道蛋白4Anti-RAB5C Antibody人孤腓肽(OFQ/N)
魯氏毛霉小鼠β甘露糖苷Anti-RAB6A Antibody人孤腓肽(OFQ/N)
嗜松青霉大鼠水通道蛋白3Anti-RABEP2 Antibody人基質(zhì)裂解(ST1)
靈芝(紅芝, 赤芝)人膠原蛋白ⅡAnti-RABL2A Antibody人基質(zhì)裂解(ST1)
釀酒酵母人促胰液/胰泌Anti-RABEP1 Antibody人基質(zhì)裂解(ST2)
根瘤菌大鼠水通道蛋白2Anti-RAC1 Antibody人基質(zhì)裂解(ST2)
孟氏假單胞菌小鼠髓過氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體IgGAnti-RAC1 Antibody人基質(zhì)裂解(ST3)
橙鱗傘小鼠一氧化氮Anti-RAB6C Antibody人基質(zhì)裂解(ST3)
秦氏蜜環(huán)菌人多肽YYAnti-RAD23A Antibody人脂氧A4(LXA4)
Bacillus subtilis subsp. inaquosorum大鼠水通道蛋白1Anti-RAD18 Antibody人脂氧A4(LXA4)
假單胞菌大鼠水通道蛋白0Anti-RACGAP1 Antibody人蛋白3特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體(PR3-ANCA)
中國葡萄座腔菌人促胃液受體Anti-RAD21 Antibody人蛋白3特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體(PR3-ANCA)
黑曲霉小鼠β萘Anti-RAD23A Antibody人β-促脂(β-LPH)
肉色杯傘人膽囊收縮/縮膽囊八肽Anti-RAD23B Antibody人β-促脂(β-LPH)
類產(chǎn)堿假單胞菌小鼠補(bǔ)體蛋白3Anti-RAD50 Antibody人脂磷壁(LTA)
類干酪乳桿菌大鼠甲狀腺球蛋白Anti-RAD52 Antibody人脂磷壁(LTA)
味覺受體蛋白家族2亞基60抗體平田頭菇人子宮頸表皮癌細(xì)胞
細(xì)胞骨架結(jié)合蛋白2抗體薄花邊傘人髓樣甲狀腺癌細(xì)胞
轉(zhuǎn)導(dǎo)β樣蛋白1抗體可可球二孢(斜面)人膽囊癌細(xì)胞
四連接TN抗體羅氏菌屬人星形膠質(zhì)細(xì)胞
EGFR和VEGFR抑制劑(BMS-690514)沙福芽孢桿 D-苯氨
健強(qiáng)地霉 L-苯氨
包氏不動桿 L-亮氨
蜜環(huán) N-乙酰-L-苯
酮丁梭 N-乙酰-L-酪
三孢布霉 N-乙酰-L-谷
蘇云金芽孢桿庫爾斯塔克亞種 N-乙酰-L-亮
球黑孢霉 肌甲酯鹽酸鹽
橄欖產(chǎn)色鏈霉 肌乙酯鹽酸鹽
截形炭團(tuán) L-別蘇
粗?jǐn)M分隔鐮刀 BOC-L-脯氨
有柄靈芝 BOC-L-氨
泰國纖細(xì)芽孢桿 BOC-L-苯氨
宋內(nèi)氏志賀氏 L-脯氨酰
醬油曲霉 D-焦谷