PI3K/mTOR抑制劑(GNE-317)公司*的產(chǎn)品：LPL(Mouse lipoprotein lipase)ELISA Kit 小鼠脂蛋白脂式碳鎂 AR
TRACP-5b(Mouse tartrate-resistant acid phosphatase 5b)ELISA Kit 小鼠抗性5b式碳鎂 CP
GIP(Mouse Glucose-dependent insulin-re

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：PI3K/mTOR抑制劑(GNE-317)

英文名稱：GNE-317

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天

商品介紹：

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

德?tīng)柌加墟呓湍干飿?biāo)記的兔抗人IgMAnti-TRPV5 Antibody多巴受體D2(DRD2)

德氏乳桿菌保加利亞亞種辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的兔抗人IgMAnti-Trypsin(PRSS1) Antibody多巴受體D1(DRD1)

鏈霉菌屬堿性磷（AP）標(biāo)記的兔抗人IgMAnti-TSC1 Antibody多巴β羥化(DβH)

雪白根霉膠體金標(biāo)記的兔抗人IgMAnti-TSARG6(DNAJB13) Antibody多氧化(PAOX)

枯草芽孢桿菌FITC標(biāo)記的兔抗人IgMAnti-TRPV5 Antibody多調(diào)節(jié)因子1結(jié)合蛋白1(PMFBP1)

微小根毛霉Cy3標(biāo)記的兔抗人IgMAnti-TSC1 Antibody對(duì)氧磷3(PON3)

香菇Cy5標(biāo)記的兔抗人IgMAnti-TSC2 Antibody(PB0181)對(duì)氧磷2(PON2)

枯草芽孢桿菌Cy5.5標(biāo)記的兔抗人IgMAnti-TSC2 Antibody對(duì)氧磷1(PON1)

枯草芽孢桿菌Cy7標(biāo)記的兔抗人IgMAnti-TSG101 Antibody短腭肺鼻腔上皮癌關(guān)聯(lián)蛋白3(SPLUNC3)

大腸埃希菌PE標(biāo)記的兔抗人IgMAnti-TSG101 Antibody短腭肺鼻腔上皮癌關(guān)聯(lián)蛋白2(SPLUNC2)

塞納加爾彎孢PE-Cy3標(biāo)記的兔抗人IgMAnti-TSLP Antibody短蛋白聚糖(BCAN)

白球擬酵母PE-CY5標(biāo)記的兔抗人IgMAnti-TSLP Antibody端錨聚合2(TNKS2)

產(chǎn)紫晶鏈孢囊菌福井亞種APC標(biāo)記的兔抗人IgMAnti-TSPAN12 Antibody端錨聚合1(TNKS1)

炭疽芽胞桿菌Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗人IgMAnti-TSHR Antibody端粒重復(fù)結(jié)合因子2相互作用蛋白(TERF2IP)

短小芽孢桿菌Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗人IgMAnti-TSHR Antibody端粒重復(fù)結(jié)合因子2(TERF2)

裂蹄層孔菌（可提供）Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗人IgMAnti-TTK Antibody端粒重復(fù)結(jié)合因子1(TERF1)

節(jié)律抑制蛋白PER1抗體伴放線放線桿菌小鼠腸靜脈組織提取物胞

節(jié)律蛋白2抗體哈氏弧菌小鼠胃粘膜組織提取物

肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白22號(hào)染色體抗體解藻弧菌（溶藻弧菌）小鼠小腸粘膜組織提取物

孤兒核受體PAR1抗體Hydrotaleaflava小鼠食管組織提取物
PI3K/mTOR抑制劑(GNE-317)解淀粉芽孢桿解淀粉亞種 阿特拉津

黑曲霉 芥子酸

普里茲灣假交替單胞 5α-膽甾烷

寄生曲霉 橘紅

孢紅鏈霉 印烏堿

葡萄座腔 3-羥基巴戟醌

多殺性巴氏桿* 菠菜甾3-O-β-D-葡萄糖苷

球形賴氨酸芽孢桿 4’-去甲基去氫鬼臼

少根根霉 毛冬青皂苷B1

鐮孢霉（加詞待譯） 毛冬青皂苷B2

楊樹(shù)菇 毛冬青皂苷B3

高山被孢霉 冬青苷O

匍枝根霉 車葉草苷酸甲酯

腐生葡萄球 10-甲氧基

冠毛犁頭霉 單密利特苷