以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
TAK-875是一種有效的,具有選擇性的GPR40激動(dòng)劑,EC50值為72nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1000413-72-8 別名:Fasiglifam 純度:98.77% 分子量:524.63 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
阿舒假囊酵母染色體區(qū)域穩(wěn)定蛋白/核輸出蛋白1抗體Human HBXIP(Hepatitis B virus X-interacting protein) ELISA Kit人A組鏈球菌多糖抗原(ASP Ag)免疫試劑盒
釀酒酵母磷化轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體Human MST1R(Macrophage-stimulating protein receptor) ELISA Kit人A激PRKA錨定蛋白12(Akap12)免疫試劑盒
豬鏈球菌ETS相關(guān)蛋白71抗體Human LOR (Loricrin) ELISA KIT人AT豐富結(jié)合域1A(ARID1A)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌外胚層發(fā)育不良蛋白1抗體Human LRTM1 (Leucine-rich repeat and transmembrane domain-containing protein 1) ELISA KIT人Apelin 免疫試劑盒
節(jié)狀鐮孢ETV3L蛋白抗體Human LDLRAP1 (Low density lipoprotein receptor adapter protein 1) ELISA KIT人Apelin 36(AP36)免疫試劑盒
直絲淡紫灰鏈霉菌酪蛋白激受體B6抗體Human LRRN4CL (LRRN4 C-terminal-like protein) ELISA KIT人apelin 13(AP13)免疫試劑盒
慢生根瘤菌溶血磷脂受體蛋白1抗體Human LECT1 (Leukocyte cell-derived chemotaxin 1) ELISA KIT人apelin 12(AP12)免疫試劑盒
樟疫霉溶血磷脂受體蛋白2抗體Human LZTR1 (Leucine-zipper-like transcriptional regulator 1) ELISA KIT人AP-5復(fù)合物β亞基(PP1030)免疫試劑盒
產(chǎn)氣莢膜梭菌 D型溶血磷脂受體蛋白3抗體Human LCP2 (Lymphocyte cytosolic protein 2) ELISA KIT人alpha突觸核蛋白(淀粉樣前體非A4成分蛋白)低聚物(SNCA oligomer)免疫試劑盒
產(chǎn)氣弧菌內(nèi)皮的分化蛋白6抗體Human LYL1 (Protein lyl-1) ELISA KIT人Alpha-D 酚/維生E(Alpha-D TPL)免疫試劑盒
醋化醋桿菌外生性骨疣樣蛋白2抗體Human POMC(Pro-opiomelanocortin) ELISA Kit人alpha-1腎上腺能受體(ADRA1)IgG抗體免疫試劑盒
釀酒酵母磷化eIF4E結(jié)合蛋白抗體Human SEMG2(Semenogelin-2) ELISA Kit人AFG3樣蛋白2(AFG3L2)免疫試劑盒
魯氏接合酵母磷化eIF4E結(jié)合蛋白抗體Human LMCD1 (LIM and cysteine-rich domains protein 1) ELISA KIT人Adropin(ENHO)免疫試劑盒
冷溫木拉克酵母內(nèi)皮特異性分子1抗體Human LYRM1 (LYR motif-containing protein 1) ELISA KIT人ADP-核糖基化因子5(ARF5)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌真核翻譯起始因子3F抗體Human LMO1 (Rhombotin-1) ELISA KIT人ADP-核糖基化因子4(ARF4)免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌真核翻譯起始因子3H抗體Human KDM1A(Lysine-specific histone demethylase 1A) ELISA Kit人ADAM金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白1基元4(ADAMTS4)免疫試劑盒
匍枝根霉(黑根霉)Rhizopus│stolonifer 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥99.5%(GC)飛薊寧
木霉屬Trichoderma│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%飛薊汀
: 43642資源名稱: 產(chǎn)鼻疽分支桿菌 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%莪術(shù)烯
GPR40激動(dòng)劑(TAK-875)谷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1H-Benzotriazole因子受體樣因子1抗體包裝500g
谷維(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Betahistine Dihydrochloride半胱亞磺脫羧抗體包裝1g
呱西替柳(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Betahistine Dihydrochloride型肝炎NS2反式調(diào)節(jié)蛋白/衰老相關(guān)的基因10蛋白抗體包裝25g
呱西替柳雜質(zhì)A(楊愈創(chuàng)木酚酯)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Betahistine Dimesilate固合成CYP11B2抗體包裝5g
癸(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: INSULIN分裂周期蛋白8抗體包裝1g
桂美(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bismuth oxide 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體包裝1g
果糖二磷鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Chloro-1,3-propanediol分裂周期蛋白16抗體包裝5g
哈西奈德(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bisoprolol fumarate有絲分裂著絲粒蛋白F抗體包裝5g
核黃磷鈉混合物(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bromhexine HCl9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框115抗體包裝25g
紅霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bupivacaine HClCTDSPL蛋白抗體包裝5g
胡椒乙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bupivacaine HClCTDSPL2蛋白抗體包裝1g
琥珀;丁二(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Butenafine HCl乙酰膽堿酯相關(guān)蛋白抗體包裝1g
琥珀多西拉敏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Captopril卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白83抗體包裝250mg
琥珀潑尼龍(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Captopril二氫嘧啶相關(guān)蛋白5抗體包裝5g
琥珀普卡必利英文名稱: (S)-Carbidopa磷化二氫嘧啶樣2抗體包裝1g