拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑(PNU-159682)公司正在出售的產(chǎn)品：(LDH)ELISA Kit 大鼠乳脫氫二氫黃酮甙 97%
(MAG Ab)ELISA Kit 大鼠抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體二氫黃酮甙 分析標(biāo)準(zhǔn)品
(CTX- I )ELISA Kit 大鼠Ⅰ型膠原C端肽柚皮苷 95%
(pIKB Alpha)ELISA Kit 大鼠化核因子κB抑制蛋白α槲皮,二水 97%
(NF-κB)ELISA

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

中國(guó)考克娃酵母四分子交聯(lián)體4抗體（四旋蛋白）Anti-HYI Antibody突觸囊泡蛋白樣蛋白2(SYTL2)

黃曲霉轉(zhuǎn)錄因子Tbx18抗體Anti-IBSP Antibody突觸囊泡蛋白Ⅻ(SYT12)

芽胞桿菌干燥綜合征相關(guān)蛋白2抗體Anti-ICAM1 Antibody突觸囊泡蛋白Ⅺ(SYT11)

天白鏈霉菌甲狀腺激受體相互作用蛋白4抗體Anti-ICAM1 Antibody突觸囊泡蛋白ⅩⅦ(SYT17)

多根硬皮馬勃β-taxilin蛋白抗體Anti-ICAM1 Antibody(PB0053)突觸囊泡蛋白ⅩⅥ(SYT16)

樟疫霉轉(zhuǎn)錄因子E2F二聚體蛋白2抗體Anti-ICA1 Antibody突觸囊泡蛋白ⅩⅤ(SYT15)

產(chǎn)黃青霉TIP30蛋白抗體Anti-ICAM1 Antibody(PB0054)突觸囊泡蛋白ⅩⅣ(SYT14)

不動(dòng)桿菌酪蛋白硫轉(zhuǎn)移1抗體Anti-ICOS Antibody突觸囊泡蛋白ⅩⅢ(SYT13)

黑曲霉Toll樣受體5抗體Anti-ICAM2 Antibody突觸囊泡蛋白Ⅹ(SYT10)

懶惰甲基桿菌跨膜和泛樣結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Anti-ICOS Antibody突觸囊泡蛋白Ⅸ(SYT9)

舒氏氣單胞菌磷化翻譯控制腫瘤蛋白抗體Anti-ICOS Antibody突觸囊泡蛋白Ⅷ(SYT8)

紫紅曲霉磷化調(diào)節(jié)染色體組裝激1抗體Anti-ICOS Antibody突觸囊泡蛋白Ⅶ(SYT7)

Bacillus subtilis subsp. inaquosorum 腫瘤抑抗體Anti-ID2 Antibody突觸囊泡蛋白Ⅵ(SYT6)

草木樨中華根瘤菌轉(zhuǎn)錄因子Tbx3抗體Anti-IDE Antibody突觸囊泡蛋白Ⅴ(SYT5)

德氏乳桿菌保加利亞亞種磷化酪羥化抗體Anti-IDE Antibody突觸囊泡蛋白Ⅳ(SYT4)

黃網(wǎng)鏈霉菌轉(zhuǎn)錄因子3抗體（螺旋環(huán)螺旋蛋白HE47）Anti-IDE Antibody突觸囊泡蛋白Ⅲ(SYT3)

5-羥色胺受體1E抗體多粘芽孢桿菌小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

5-羥色胺受體1F抗體醋桿菌屬小鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞

5-羥色胺受體2A抗體羊肚菌屬（斜面）小鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞

5-羥色胺受體2B抗體水井坊梭菌小鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑(PNU-159682)尖頂羊肚 4-苯甲酰角質(zhì)Elisa

大腸埃希氏 銅、鐵、鎳、釩/Cu, Fe, Ni, V骨堿性磷酸Elisa

微小鏈霉 銅、鐵、鎳、釩/Cu, Fe, Ni, VCD14分子Elisa

滋養(yǎng)節(jié)桿 4-溴苯酸輪狀病IgG抗體Elisa

生暗灰鏈霉 銅、鐵、鎳、鋅/Cr, Cu, Ni, Zn核糖基轉(zhuǎn)移1Elisa

直喙鐮刀 羧甲基-β-環(huán)糊精核糖磷酸焦磷酸激1Elisa

密蘇里游動(dòng)放線 鎘、銅、鉛、鋅/Cd, Cu, Pb, Zn脫氫Elisa

耐鹽芽孢桿 鈣、鍶、鋇、鋰/Ca, Sr, Ba, Li絲氨酸蛋白Elisa

解淀粉芽孢桿 2,6-二吡啶-4-甲酸內(nèi)皮Elisa

蘇云金芽胞桿庫(kù)爾斯塔克亞種 枯名Tau蛋白Elisa

金龜子綠僵 鎘、銅、鎳、鋅/Cd, Cu, Pb, Zn磷酸化Tau蛋白Elisa

產(chǎn)凍膠 塞來西布Aβ42Elisa

白色雞腿菇 鈣，，鎂，鈉/Ca, K, Mg, Na（鹽酸介質(zhì)）偽狂犬分泌型sIgA抗體Elisa

腸膜明串珠右旋葡聚糖亞種 3,4-二羥基半胱氨酸蛋白3Elisa

藤黃八疊球 S-8大孔吸附樹脂乳清酸蛋白Elisa