公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:LSD1抑制劑(ORY-1001)
英文名稱:ORY-1001
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
ORY-1001(RG-6016)是LSD1抑制劑,出自WO2013057322A1。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1431326-61-2 別名:RG-6016 純度:98.0% 分子量:303.27 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌環(huán)指蛋白105抗體Anti-HTR2A Antibody突觸融合蛋白8(STX8)
蘇云金芽孢桿菌環(huán)指蛋白125抗體Anti-HTR1A Antibody突觸融合蛋白7(STX7)
黑曲霉凝血(凝血因子II)重鏈抗體Anti-HSPH1 Antibody突觸融合蛋白6(STX6)
大腸埃希氏菌轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體3抗體(TGF-βRⅢ,TGFβRⅢ)Anti-HTR3A Antibody突觸融合蛋白5(STX5)
產(chǎn)氣莢膜梭菌 C型辣椒受體抗體Anti-HTRA3 Antibody突觸融合蛋白4(STX4)
膜醭畢赤酵母腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1抗體Anti-HTR2B Antibody突觸融合蛋白3(STX3)
松口蘑胸腺肽α1抗體Anti-HTRA1 Antibody突觸融合蛋白2(STX2)
少根根霉金屬蛋白組織抑制因子-4抗體Anti-HTT Antibody突觸融合蛋白1B(STX1B)
歧異假絲酵母金屬蛋白組織抑制因子-1抗體(N端)Anti-HYAL1 Antibody突觸融合蛋白1A(STX1A)
香菇金屬蛋白組織抑制因子-2抗體Anti-HYAL1 Antibody突觸融合蛋白19(STX19)
粘金黃桿菌甲狀腺T4抗體Anti-HYAL3 Antibody突觸融合蛋白18(STX18)
金黃色葡萄球菌TIGAR蛋白抗體Anti-HYAL1 Antibody突觸融合蛋白17(STX17)
節(jié)桿菌CD90抗體Anti-HYAL2 Antibody突觸融合蛋白16(STX16)
片球菌屬線粒體DNA拓普西異構(gòu)Ⅰ抗體Anti-Iba1 Antibody突觸融合蛋白12(STX12)
小孢盤(pán)多毛孢突觸融合蛋白結(jié)合蛋白5抗體Anti-Iba1 Antibody突觸融合蛋白11(STX11)
枯草芽孢桿菌UNC80蛋白抗體Anti-IBSP Antibody突觸融合蛋白10(STX10)
核轉(zhuǎn)錄因子SOX6抗體阿氏絲孢酵母小鼠滑膜細(xì)胞
核轉(zhuǎn)錄因子SOX8抗體雅致放射毛霉小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞
STAC1蛋白抗體紅曲紅曲(斜面)小鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞
5-羥色胺受體1D抗體停滯棒桿菌小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
LSD1抑制劑(ORY-1001)大孢硬皮馬勃 酸倍他索直接膽紅Elisa
固囊酵母 美托洛爾甲胎蛋白Elisa
短桿屬 芳樟異常凝血原Elisa
相思根瘤 乙酸龍腦酯尿Elisa
空泡單胞 、鈉、磷、鈦/K, Na, P, Ti囊蟲(chóng)病抗體Elisa
灰樹(shù)花 軟骨硫酸鈉鹽補(bǔ)體片斷5Elisa
枯草芽孢桿 、鈉、磷、鈦/K, Na, P, Ti糖聚糖Elisa
弗氏檸檬酸桿 氟、、硝酸根、硫酸根/F, Cl, NO3, SO4間接膽紅Elisa
瓜果腐霉 5'-脫氧-5-氟胞苷高密度脂蛋白膽固Elisa
阪崎腸桿 氟、、硝酸根、硫酸根/F, Cl, NO3, SO4低密度脂蛋白膽固Elisa
豬鏈球II型 氟、、溴、/F, Cl, Br, I偽狂犬病抗體Elisa
貝倫格葡萄座腔 D-941吸附樹(shù)脂總超氧化物歧化Elisa
谷氨酸棒桿 2,5-二甲基-1,4-苯二天蠶P1Elisa
成團(tuán)泛 銅、鉛、硒、碲/Cu, Pb, Se, Te鐵調(diào)Elisa
枯草芽孢桿枯草亞種 銅、錳、鉛、鋅/Cu, Mn, Pb, Zn狂犬病抗體Elisa