ROCK II抑制劑（chroman 1）公司正在出售的產(chǎn)品：HSP-90 Beta/FITC 熒光標(biāo)記HSP-90β蛋白抗體IgGL-氨酰-L-谷酰 98%
HSP27/RBITC 紅色熒光羅丹明標(biāo)記熱休克蛋白-27抗體IgG4-聯(lián)苯 98%
HSP-105/FITC 熒光標(biāo)記熱休克蛋白HSP105抗體IgG3-溴鄰二苯 98%
HSTF2/HSF2 /FITC 熒光標(biāo)記熱休克轉(zhuǎn)錄因子

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
芽胞桿菌小鼠α半乳糖基抗原Anti-RAB29 Antibody人蛋白S(Protein S)

郝氏青霉大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199Anti-RAB2B Antibody人蛋白S(Protein S)

福山假絲酵母人幽門螺旋桿菌IgMAnti-RAB31 Antibody人可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)

蟲草大鼠血紅氧合1Anti-RAB29 Antibody人可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)

惡臭假單胞菌小鼠β基己糖苷AAnti-RAB33A Antibody人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)

粘質(zhì)沙雷氏菌人相關(guān)蛋白AAnti-RAB35 Antibody人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)

頂頭孢霉大鼠磷脂A2Anti-RAB34 Antibody人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)

白絨紅蛋巢菌小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白AAnti-RAB37 Antibody人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)

焦曲霉小鼠克蛋白Anti-RAB38 Antibody人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)

總狀共頭霉大鼠組織因子途徑抑制物Anti-RAB40B Antibody人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)

耐輻射奇球菌人胃抑Anti-RAB3GAP2 Antibody人2,3-二磷甘油(2,3-DPG)

散囊菌小鼠β半乳糖苷Anti-RAB3GAP2 Antibody人2,3-二磷甘油(2,3-DPG)

煙曲霉大鼠水通道蛋白5Anti-RAB3GAP1 Antibody人基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白(LUM)

釀酒酵母人胃泌釋放多肽Anti-RAB3IP Antibody人基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白(LUM)

光滑青霉人胃泌釋放肽前體Anti-RAB41 Antibody人Na+/H+交換體3(NHE3)

茯苓小鼠腎上腺Anti-RAB40B Antibody人Na+/H+交換體3(NHE3)

跨膜蛋白106B抗體國大鐘菇人膀胱移行細(xì)胞乳頭瘤細(xì)胞

腫瘤壞死因子誘導(dǎo)蛋白3相互作用蛋白1抗體青黃褐硬皮馬勃pCDNA3.1-his-TNFRSF4

瞬時受體電位通道蛋白4抗體地星TNFRSF4人源基因

神經(jīng)元蛋白22抗體褐疣柄牛肝菌人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
ROCK II抑制劑（chroman 1）彎孢霉 BOC-L-異亮

乳酸鏈球 BOC-L-苯甘

傷寒沙門氏 BOC-D-苯甘

忍冬木層孔 BOC-D-谷

直立毛霉 BOC-L-谷

釀酒酵母 BOC-L-谷氨酰

矮小微桿 BOC-D-天冬酰

枯草芽孢桿 BOC-L-天冬酰

Corynebacterium variabile D-色氨

柱狀田頭菇（茶樹菇、楊樹菇） L-異亮氨

恩斯維希尼克氏酵母 L-纈氨

Paenibacillus L-蘇氨

枯草芽孢桿 L-蛋氨

蘑菇U3 D-脯氨

粉紅單端孢 D-苯甘氨