以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
SHP2抑制劑 | SHP099 hydrochloride | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
英文名稱:SHP099 hydrochloride 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg SHP099 hydrochloride是有效選擇性的SHP2抑制劑,IC50值為70nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1801747-11-4 純度:99.40% 分子量:388.72 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
球毛殼菌幾丁質(zhì)結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Human MYH10(Myosin Heavy Chain 10, Non Muscle) ELISA Kit人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)免疫試劑盒
小孢根霉嵌合蛋白2/β2-chimaerin抗體Human NPYR2(Neuropeptide Y Receptor Y2) ELISA Kit人乳糖凝集8(LGALS8)免疫試劑盒
人參土成對(duì)桿菌幾丁質(zhì)1抗體Human MAN1A1(Mannosidase Alpha Class 1A Member 1) ELISA Kit人乳脫氫A(LDHA)免疫試劑盒
假單胞菌屬白抗原CD97 alpha 抗體Human MMP-24(Matrix Metalloproteinase 24) ELISA Kit人乳清磷核糖轉(zhuǎn)移(OPRT)免疫試劑盒
更新世肉桿菌緊密連接蛋白2抗體Human MANF(Mesencephalic Astrocyte Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit人乳過氧化物(LPO)免疫試劑盒
淋病奈瑟菌緊密連接蛋白7抗體Human MAPK(Mitogen Activated Protein Kinase) ELISA Kit瘤抗原1(SAGE1)免疫試劑盒
海南油脂酵母2號(hào)染色體開放閱讀框53抗體Human MMP-25(Matrix Metalloproteinase 25) ELISA Kit堿O-棕櫚?;D(zhuǎn)移1,肝亞型(CPT1A/CPT1)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌2號(hào)染色體開放閱讀框54抗體Human MMRN1(Multimerin 1) ELISA Kit堿免疫試劑盒
哈茨木霉2號(hào)染色體開放閱讀框56抗體Human KERA(KeRatocan) ELISA Kit堿脂酰轉(zhuǎn)移(CACT)免疫試劑盒
熱脫氮地芽孢桿菌熱脫氮亞種2號(hào)染色體開放閱讀框61抗體Human LZMg(Lysozyme G) ELISA Kit堿O -乙酰基轉(zhuǎn)移(CRAT/CAT1)免疫試劑盒
茯苓癌相關(guān)抗原抗體Human LAMA4(Laminin Alpha 4) ELISA Kit人溶血血小板活化因子(lyso-PAF)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌分裂周期相關(guān)蛋白4抗體Human LAT(Linker For Activation of T-cell) ELISA Kit人溶體相關(guān)膜蛋白2(HLAMP-2)免疫試劑盒
新疆糖絲菌色b5抗體Human LACTβ(β-Lactamase) ELISA Kit人溶菌(LZM)免疫試劑盒
球孢白僵菌鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體2抗體Human LDL(Low Density Lipoprotein) ELISA Kit人絨毛膜促性腺激(HCG)免疫試劑盒
禽腺病1號(hào)染色體開放閱讀框186抗體Human LCA/CD45(Leukocyte Common Antigen) ELISA Kit人相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)免疫試劑盒
白布勒擔(dān)孢酵母CXC趨化因子16抗體Human LDHB(Lactate Dehydrogenase B) ELISA Kit人特異性蛋白B(PSPB)免疫試劑盒
異孢單頂孢Monacrosporium│heterosporum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRCCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ試劑盒大黃-8-O-β-D-葡萄糖苷
海洋桿菌Pontibacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRCCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α試劑盒酰
香菇Lentinula│edodes 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRcAMP和cAMP抑制cGMP 3',5'循環(huán)磷二酯10A試劑盒丁香
SHP2抑制劑韓芝 5-基-7-氮雜前列腺Elisa
產(chǎn)氣莢膜梭 C型 5-氨基-2,4-二嘧啶抗抗體Elisa
鏈孢囊 5-溴間苯二甲酸二甲酯胰島樣生長(zhǎng)因子3Elisa
三葉草根瘤 3-巰基-1-己胰島樣因子3Elisa
膜醭畢赤酵母 3-甲硫基-1-己白介12βElisa
釀酒酵母 3,3'-二溴-2,2'-聯(lián)噻吩抗鵝細(xì)小病Elisa
類食品乳桿 1,8-二-9,10-二苯乙炔基蒽卵清蛋白特異性IgG抗體Elisa
蕈狀芽孢桿 二磷酸組 一水合物卵清蛋白特異性IgA抗體Elisa
蘇云金芽孢桿 反式-4-甲氧基-3--2-酮脂多糖特異性IgA抗體Elisa
圓弧青霉 3-乙基-2,4-甲基吡咯組蛋白去乙?;疎lisa
硫磺 6-氨基熒光硫氧還蛋白相互作用蛋白Elisa
廈門海源桿 5-氨基-1-苯基-1H-吡唑-4-羧酸叉頭型基因A2Elisa
維多利亞維希尼克氏酵母 2-二苯甲酮胰島淀粉樣多肽Elisa
膠孢 甲基硫酸新斯的明III型膠原蛋白Elisa
Ensifer adhaerens (R)-(?)-環(huán)氧烷山梨脫氫Elisa