Chk1抑制劑公司正在出售的產(chǎn)品：Cyclin-D2 ELISA Kit 大鼠周期D2N,N,N',N'-四-1,3-二 99%
Cyclin-D1 ELISA Kit 大鼠周期D1N,N,N',N'-四-1,3-二 97%
MBP ELISA Kit 大鼠髓脂性蛋白銨 99%
AFP ELISA Kit 大鼠種胎兒球蛋白/胎蛋白化銨 AR,99.0%
PAP ELISA Kit 大鼠前

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

金針菇（毛柄金錢(qián)菌、冬菇）賴缺陷型蛋白激1抗體Anti-MMP10 Antibody橋連整合因子2(BIN2)

迂回殼囊孢菌磷化WEE1蛋白抗體Anti-MMP10 Antibody橋連整合因子1(BIN1)

米黃絲膜菌Wnt信號(hào)抑制因子1抗體Anti-MMP12 Antibody橋粒芯糖蛋白4(DSG4)

慢生根瘤菌結(jié)締組織生長(zhǎng)因子樣蛋白抗體Anti-MMP13 Antibody橋粒芯糖蛋白3(DSG3)

北里胞菌原癌基因wnt7a蛋白抗體Anti-MMP12 Antibody橋粒芯糖蛋白1(DSG1)

摩加夫芽胞桿菌信號(hào)通路WNT10A抗體Anti-MMP13 Antibody橋粒芯膠粘蛋白3(DSC3)

枯草芽孢桿菌信號(hào)通路Wnt5a抗體Anti-MMP13 Antibody橋粒芯膠粘蛋白2(DSC2)

小孢根霉須狀變種p21調(diào)控蛋白WISP39抗體Anti-MMP13 Antibody橋粒芯膠粘蛋白1(DSC1)

紫蓋蜜環(huán)菌野生型P53誘導(dǎo)基因1抗體Anti-MMP14 Antibody橋粒聯(lián)結(jié)蛋白(AHNAK)

貴州綠僵菌心肌缺血預(yù)處理正調(diào)節(jié)蛋白2抗體Anti-MMP15 Antibody橋粒斑蛋白(DSP)

粘蓋牛肝菌*Wolfram綜合征蛋白1抗體Anti-MMP14 Antibody羥酰水解(HAGH)

雞傷寒沙門(mén)氏菌磷化賴缺陷型蛋白激1抗體Anti-MMP16 Antibody羥氧化2(HAO2)

大腸埃希氏菌WNK4抗體Anti-MMP16 Antibody羥氧化1(HAO1)

柿盤(pán)多毛孢包含氧化還原的WW域抗體Anti-MMP2 Antibody羥甲基戊二酰合(HMGCS)

Albidiferax色豐富蛋白抗體Anti-MMP2 Antibody羥甲基膽合(HMBS)

南方鹽單胞菌X射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白抗體Anti-MMP20 Antibody羥基異構(gòu)(HYI)

細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白抗體腸沙門(mén)氏菌腸亞種波那雷恩血清型人胃MatchPair™:胃壁細(xì)胞和胃腫瘤原代細(xì)胞

血清學(xué)定義結(jié)腸抗原1抗體左旋乳芽孢桿菌人胰腺M(fèi)atchPair™:胰腺上皮細(xì)胞和腫瘤原代細(xì)胞

結(jié)腸抗原8抗體亮桿菌屬人直腸MatchPair™：直腸上皮細(xì)胞和直腸腫瘤原代細(xì)胞

結(jié)腸抗原10抗體鏈霉菌屬人子宮頸胞MatchPair™:宮頸上皮細(xì)胞和腫瘤原代細(xì)胞
Chk1抑制劑釀酒酵母 2,6-二氟乳酸Elisa

薄狀枝頂孢 1,2,4-三氮唑葡萄糖Elisa

木耳 1-氨基海因鹽酸鹽胰脂肪Elisa

楊樹(shù)口蘑 鄰苯二甲酸二異癸酯胰淀粉Elisa

秦氏蜜環(huán) 二十三酸超氧陰離子Elisa

纖細(xì)芽孢桿屬 2,4,6-三氮酚酪氨酸羥化Elisa

釀酒酵母 苊烯環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷Elisa

匿名曲霉 2-溴聯(lián)苯環(huán)磷酸腺苷Elisa

枯草芽孢桿 9,10-二苯基蒽11-酮基睪酮Elisa

白僵 磺吡啶Elisa

阿魏側(cè)耳(阿魏菇) 磺醋酰維生B3Elisa

斯達(dá)氏油脂酵母 哌(六水)5羥色Elisa

曲霉 4-(叔辛基)兒茶酚Elisa

芽孢桿 4,4-二氨基二苯硫腎上腺Elisa

普拉特鏈霉 五苯硫酚維生B5Elisa