公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:HDAC抑制劑(Dacinostat)
英文名稱:Dacinostat
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Dacinostat是一種有效的HDAC抑制劑,IC50值為32nM;同時(shí)可抑制HDAC1的活性,IC50值為9nM,主要用于癌癥研究。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):404951-53-7 別名:NVP-LAQ824;LAQ824 純度:97.23% 分子量:379.45 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
土生類諾卡氏菌Wnt信號(hào)受體蛋白抗體Anti-MIF Antibody(PB0314)親核α3(KPNα3)
葡萄糖桿菌屬富含脯同源蛋白1抗體Anti-MIF Antibody親核α2(KPNα2)
桔青霉原癌基因WIP1抗體Anti-MitoNEET/CISD1 Antibody親核α1(KPNα1)
黃色單胞菌信號(hào)通路Wnt2B抗體Anti-MIP Antibody鞘磷脂脂質(zhì)蛋白1(PLP1)
美澳型核果褐腐病菌WEE1蛋白抗體Anti-MKP-1/DUSP1 Antibody鞘磷脂磷二酯4(SMPD4)
釀酒酵母WRCH1抗體Anti-MKI67 Antibody(PB0065)鞘磷脂磷二酯3(SMPD3)
Glarea lozoyensis絲/蘇激家族成員的基因WNK3抗體Anti-MLC1 Antibody鞘磷脂合2(SGMS2)
釀酒酵母信號(hào)通路Wnt9a抗體Anti-MLH1 Antibody鞘磷脂合1(SGMS1)
紫產(chǎn)色鏈孢囊菌Wnt1信號(hào)通路蛋白1抗體Anti-MLH1 Antibody鞘磷脂蛋白0(MPZ)
鑲邊鏈霉菌WASP結(jié)合蛋白抗體Anti-MME Antibody(PB0026)鞘磷脂(SPH)
大腸桿菌屬野生型P53誘導(dǎo)基因1抗體Anti-MMP1 Antibody鞘激2(SPHK2)
沼澤微桿菌Verprolin同源結(jié)構(gòu)域包含蛋白3抗體Anti-MMP1 Antibody鞘激1(SPHK1)
吸水鏈霉菌灰色變種信號(hào)通路Wnt11抗體Anti-MMP1 Antibody鞘1磷酯受體1(S1PR1)
飲料 亮藍(lán)、紅信號(hào)傳導(dǎo)抑制蛋白WD重復(fù)蛋白2抗體Anti-MMP10 Antibody鞘-1-磷磷1(SGPP1)
福氏嗜冷桿菌WW結(jié)構(gòu)域E3泛連接1抗體Anti-MMP11 Antibody橋尾蛋白(GPHN)
橄欖假絲酵母WD重復(fù)蛋白16抗體Anti-MMP11 Antibody橋連整合因子3(BIN3)
突觸泡蛋白2A抗體湯卜遜沙門氏菌人皮膚MatchPair™:皮膚表皮角質(zhì)形成細(xì)胞和腫瘤原代細(xì)胞
長鏈脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體山夫頓堡沙門氏菌人前列腺M(fèi)atchPair™:前列腺上皮細(xì)胞和腫瘤原代細(xì)胞
轉(zhuǎn)錄抑制蛋白Sin3b抗體型副傷寒沙門氏菌人乳腺M(fèi)atchPair™:乳腺上皮細(xì)胞和腫瘤原代細(xì)胞
相關(guān)蛋白16抗體多主枝孢霉人腎MatchPair™:腎上皮細(xì)胞和腫瘤原代細(xì)胞
HDAC抑制劑(Dacinostat)鏈霉屬 溴化亞銅白介1αElisa
地衣芽孢桿 硫化銅血糖Elisa
枯草芽孢桿 硫酸銅病性出血性敗血癥病Elisa
擬卵蓋鵝膏 硬脂酸鎂神經(jīng)壞死病Elisa
深紅酵母 乙酸鎂硫酸軟骨Elisa
炭疽芽胞桿 磷酸氫鎂精氨酸Elisa
釀酒酵母 氫氧化鎂轉(zhuǎn)酮Elisa
釀酒酵母 氟化鎂肌酐酸Elisa
球孢白僵 氧化鎂色P450Elisa
金針菇 無水硫酸鎂Elisa
墳?zāi)构?jié)桿 3,5-二蛋白Elisa
美澳型核果褐腐病 褐煤酸脂肪Elisa
細(xì)疣籃狀 蠟酸過氧化氫Elisa
柑橘青霉 二十五碳酸過氧化物Elisa
棘孢木霉 3,4-二氨苯總抗氧化能力Elisa