商品介紹:
1-Deoxynojirimycin(DNJ,Duvoglustat)是一種有效的α葡萄糖苷酶抑制劑,抑制餐后血糖,從而防止糖尿病。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:19130-96-2 別名:Duvoglustat 純度:98.0% 分子式:C?H??NO? 分子量:163.17 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
擬香味類香味菌磷化GATA結(jié)合蛋白3抗體Human UNC45A ELISA Kit大鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成(iNOS)免疫試劑盒
沙氏芽孢桿菌延伸因子G2抗體Human UQCR ELISA Kit大鼠游離脂肪(FFA)免疫試劑盒
姬松茸*葡糖淀粉抗體Human UNC45B ELISA Kit大鼠游離原卟啉(FEP)免疫試劑盒
釀酒酵母谷酰6-磷果糖轉(zhuǎn)移抗體Human UNC5A ELISA Kit大鼠游離狀腺原(Free-T3)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母胱甘肽S轉(zhuǎn)移θ抗體Human UNC5CL ELISA Kit大鼠游離肉堿免疫試劑盒
樟疫霉甘肽S轉(zhuǎn)移θ2抗體Human UNC5D ELISA Kit大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)免疫試劑盒
檸檬色葡萄球菌γ-谷酰轉(zhuǎn)肽6抗體Human UNG ELISA Kit大鼠游離甲狀腺(FT4)免疫試劑盒
閃光須霉顆粒A抗體Human UNKL ELISA Kit大鼠游離睪(F-TESTO)免疫試劑盒
金灰青霉顆粒D/B/E/N/G/F/H抗體Human UQCR ELISA Kit大鼠游離雌三(FE3)免疫試劑盒
紅曲紅曲粒-巨噬集落激因子3受體抗體Human UNC45A ELISA Kit大鼠游離β絨毛膜促性腺激(f-βCG)免疫試劑盒
分枝卷霉血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗體Human UNC45B ELISA Kit大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)免疫試劑盒
溶藻弧菌G蛋白修補結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體Human UNC5A ELISA Kit大鼠硬脂酰去飽和1(SCD1)免疫試劑盒
豇豆慢生根瘤菌G蛋白偶聯(lián)受體GPR63蛋白抗體Human UGT8 ELISA Kit大鼠吲哚2,3-雙加氧(IDO)免疫試劑盒
豬鏈球菌磷化珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1抗體Human UHMK1 ELISA Kit大鼠抑制結(jié)合蛋白(INHBP)免疫試劑盒
成團泛菌G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體Human POMT1(Protein O-mannosyl-transferase 1) ELISA Kit大鼠抑制B(INH-B)免疫試劑盒
孟氏假單胞菌G蛋白偶聯(lián)受體15抗體Human UHRF1BP1L ELISA Kit大鼠抑制A(INH-A)免疫試劑盒
蠟樣芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格:AR,200目,粉末狀,褐色去澤拉木
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:CP,200目,粉末狀,褐色人參皂苷F3
三葉草根瘤菌Rhizobium│trifolii 質(zhì)量規(guī)格:AR,20-50目萊苞迪甙D
α葡萄糖苷酶抑制劑(1-Deoxynojirimycin)5-羥色鹽鹽(標準品)英文名稱: Potassium bicarbonate轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗體包裝500g
6'''-阿魏酰斯皮諾英文名稱: Sodium dodecanesulfonate內(nèi)皮受體蛋白酪激抗體包裝250mg
6''-O-二?;玖夏拒沼⑽拿Q: Theophylline酪蛋白激受體B2抗體包裝1g
6''-二沙苑子苷單酯英文名稱: Cellulase磷化雌受體ER alpha 抗體包裝5g
6'-O-β-D-葡萄糖基龍膽苦苷英文名稱: Chondroitin sulfate重組增強型綠色熒光蛋白抗體包裝25ml
6'-O-β-D-芹糖獐芽菜苷英文名稱: Isonicotinic acid雌受體α抗體(用于western blot)包裝5ml
6,7,4'-三羥基異黃英文名稱: L-Malic acid雌受體α/β抗體包裝25g
6-氧基二氫血根堿英文名稱: Proteinase K Solution, 20 mg/ml自分泌運動因子抗體包裝5g
6-氧基山柰酚-3-O-蕓香糖苷英文名稱: Poly-L-lysine solution ( 0.1%)酪蛋白激A3受體抗體包裝100ml
6-姜酚(姜辣)英文名稱: Tetracycline hydrochloride solution, 50 mg/ml, sterileEHM2蛋白抗體包裝1g
6-姜烯酚(標準品)英文名稱: D-Glucose-6-phosphate, disodium, dihydrate磷化真核翻譯起始因子4E抗體包裝1g
6-羥基(標準品)英文名稱: Sodium succinate翻譯延伸因子EF-1a抗體包裝5g
6-基異麥冬黃烷A(標準品)英文名稱: Hemoglobin磷化雌受體α抗體包裝1g
7,4'-二羥基黃(標準品)英文名稱: PEG 10000磷化表皮生長因子受體抗體包裝1g
7,8-二氫生物蝶呤英文名稱: DL-Malic acid磷化絲裂原活化蛋白激1抗體包裝5g