商品介紹:
HG6-64-1是有效選擇性的B-Raf抑制劑,來自WO2011090738A2,化合物實例9(XI-1)。在B-raf V600E轉(zhuǎn)化的Ba/F3細(xì)胞中IC50值為0.09μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1315329-43-1 別名:HG-6-64-01;HG-6-64-1;HG 6-64-1 純度:99.05% 分子量:577.64 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
B-Raf抑制劑(HG6-64-1) | HG6-64-1 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
枝狀枝孢熒光PE標(biāo)記羊IgMAnti-IFNL1 Antibody人抗凝血抗體(aPT1/aPT2)
枯草芽胞桿菌熒光PE標(biāo)記豚鼠IgGAnti-IFNL2 Antibody人抗凝血抗體(aPT1/aPT2)
短莖青霉熒光PE標(biāo)記豚鼠IgMAnti-IFNW1 Antibody人磷脂酰肌抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)
迷宮栓孔菌熒光PE標(biāo)記馬IgGAnti-IFRD1 Antibody人磷脂酰肌抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)
頂孢頭孢霉熒光PE標(biāo)記馬IgMAnti-IGF1R Antibody人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)
微小桿菌熒光PE標(biāo)記人IgGAnti-IFNL2 Antibody人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)
枯草芽胞桿菌熒光PE標(biāo)記人IgMAnti-IGFBP3 Antibody人組織蛋白抗體(Cath Ab)
熒光PE標(biāo)記人IgAAnti-IGFN1 Antibody人組織蛋白抗體(Cath Ab)
乳桿菌屬熒光PE標(biāo)記猴IgGAnti-IGHA1 Antibody人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTF Ab-Ig)
淺綠黃假單胞菌熒光PE標(biāo)記猴IgMAnti-IGHD Antibody人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTF Ab-Ig)
疣梗青霉熒光PE標(biāo)記小鼠IgMAnti-IGHG1 Antibody人抗殺菌通透性增高蛋白抗體(BPI-Ab)
釀酒酵母熒光PE標(biāo)記豬IgGAnti-IGHM Antibody人抗殺菌通透性增高蛋白抗體(BPI-Ab)
鏈霉菌屬熒光PE標(biāo)記水貂IgGAnti-IGLL1 Antibody人髓過氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)
馬腺疫鏈球菌獸疫亞種熒光PE標(biāo)記兔IgMAnti-IGSF8 Antibody人髓過氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)
矩圓黑盤孢熒光PE標(biāo)記大鼠IgMAnti-IK Antibody人抗蛋白3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)
釀酒酵母熒光PE標(biāo)記重組人白介-1受體拮抗劑Anti-IKB alpha(NFKBIA) Antibody人抗蛋白3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)
呼吸道合胞核蛋白抗體多頭被孢人骨肉瘤細(xì)胞
RAS相關(guān)GTP結(jié)合蛋白C抗體小被孢霉人源胰腺癌細(xì)胞
DNA修復(fù)蛋白Rad23抗體深黃被孢霉小鼠艾氏腹水瘤細(xì)胞
RhoGTP激活蛋白1/血管畸形骨肥大綜合征相關(guān)蛋白抗體紅曲霉菌鼠B淋巴瘤細(xì)胞
B-Raf抑制劑(HG6-64-1)炭疽芽孢桿 攀登魚藤異黃酮
谷棒桿 Voleneol
隱藏青霉 粘毛黃芩 III 四乙酸酯
Litorimicrobium taeanense 粘毛黃芩III
桿狀鏈霉 Villosin
枯草芽孢桿 Vellosimine
新城疫病 Trilobatin
鴨疫里氏桿 反式-異扁柏脂
谷棒桿 委陵菜酸,2Α,19Α-二羥基熊果酸
威爾酵母 Torilin
不動桿 妥包
香菇(可訂購) threo-Guaiacylglycerol
日本甲蟲類芽孢桿生 黃夾苦甙
耐放射異常球 Thevetin B
Bacillus aryabhattai Tetrahydroamentoflavone