公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):P-糖蛋白抑制劑(唑喹達(dá)三鹽酸鹽)
英文名稱(chēng):Zosuquidar trihydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Zosuquidar trihydrochloride是一種有效的P-糖蛋白介導(dǎo)的多藥耐抗性的調(diào)節(jié)劑,,其中Ki值為59nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):167465-36-3 別名:RS 33295-198 trihydrochloride;LY-335979 trihydrochloride 純度:98.75% 分子量:636.99 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
新月彎孢增殖潛能相關(guān)蛋白抗體Anti-CTSE Antibody腫瘤壞死因子受體超家族成員1B(TNFRSF1B)
櫟鏈格孢RhoC抗體Anti-CTSG Antibody腫瘤壞死因子受體超家族成員1A(TNFRSF1A)
簡(jiǎn)單芽孢桿菌環(huán)指蛋白170抗體Anti-CTSG Antibody腫瘤壞死因子配體超家族成員9(TNFSF9)
假單胞菌環(huán)指蛋白185抗體Anti-CTSG Antibody(PB1105)腫瘤壞死因子配體超家族成員7(TNFSF7)
玉龍小單孢菌RHOG抗體Anti-CTSK Antibody(PB0891)腫瘤壞死因子配體超家族成員4(TNFSF4)
放射形根瘤菌RPS27A抗體Anti-CTSL1(Cathepsin L1) Antibody腫瘤壞死因子配體超家族成員14(TNFSF14)
Rhizobium jaguaris 核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB受體抗體(核因子kB受體活化因子)Anti-CUL1 Antibody腫瘤壞死因子配體超家族成員13(TNFSF13)
釀酒酵母維甲相關(guān)孤兒受體α抗體Anti-CUEDC2 Antibody腫瘤壞死因子配體超家族成員12(TNFSF12)
煙熏褐離褶傘呼吸道合胞病核蛋白抗體Anti-CUL1 Antibody腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白2(TNFαIP2)
谷棒桿菌核糖體蛋白S6激家族RSK3抗體Anti-CUL1 Antibody腫瘤關(guān)聯(lián)糖蛋白72(TAG72)
PseudorhodobacterRCCD1蛋白抗體Anti-CTTN Antibody腫瘤蛋白p53結(jié)合蛋白1(TP53BP1)
枯草芽胞桿菌磷化周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體Anti-CUL2 Antibody中性鞘磷脂(NSMASE)
豬瘟病磷化減數(shù)分裂重組蛋白家族REC8抗體Anti-CUL3 Antibody中性粒明膠關(guān)聯(lián)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)
豬丹絲菌ATP依賴(lài)解旋RENT1抗體Anti-CUL4B Antibody中性粒彈性蛋白(ELA2)
植物乳桿菌Ras相關(guān)雌激調(diào)節(jié)生長(zhǎng)抑制蛋白Anti-CUL2 Antibody中心體肌動(dòng)蛋白β(CTRN2)
光孢黃叢枝珊瑚菌核糖1,5二磷羧化抗體Anti-CUL4A Antibody中心體蛋白3(CETN3)
巴斯德畢赤酵母Pichia│pastoris 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
陰溝腸桿菌Enterobacter│cloacae 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
豬流感病毒Influenzavirus A│Swine influenza virus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
P-糖蛋白抑制劑(唑喹達(dá)三鹽酸鹽)硫氧化博斯氏 LBS瓊脂環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷Elisa
糙皮側(cè)耳 MRS瓊脂環(huán)磷酸腺苷Elisa
兩形頭曲霉 ITC肉湯環(huán)氧合2Elisa
秦氏蜜環(huán) 環(huán)戊硫活化蛋白CElisa
根瘤 BETA-SSA瓊脂活性氧簇Elisa
產(chǎn)氣莢膜梭 C型 LIM培養(yǎng)基肌球蛋白輕鏈磷酸Elisa
威爾氏李斯特 煌綠黃嘧啶瓊脂肌酸激Elisa
大腸埃希 改良MSRV培養(yǎng)基肌酸激同工MBElisa
枯草芽孢桿 SCCRAM肉湯基質(zhì)金屬蛋白1Elisa
香菇 (1S,2S)-N-(對(duì)甲苯磺酰)-1,2-二苯基乙二基質(zhì)金屬蛋白13Elisa
三孢布拉霉 BPL瓊脂基質(zhì)金屬蛋白9Elisa
白地霉 BPLS瓊脂敏感性脂肪Elisa
副豬嗜血桿 改良BPLS瓊脂己糖激Elisa
褐紅小孔 XLT4瓊脂甲狀腺Elisa
蘇云金芽胞桿勵(lì)木亞種 M-肉湯堿性磷酸Elisa