商品介紹:
Marimastat是一種廣譜的MMPs抑制劑,作用于MMP-9,MMP-1,MMP-2,MMP-14和MMP-7,IC50值分別為3,5,6,9和13nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:154039-60-8 別名:BB2516;TA2516 純度:95.65% 分子量:331.41 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
球孢白僵菌磷化急性髓白血病1蛋白抗體Anti-CTBP2 Antibody軸突生長誘向因子3(Ntn3)
呂氏泰勒蟲(鎮(zhèn)原株)DNA修復(fù)蛋白Rad23抗體Anti-CTH Antibody軸突蛋白3(NRXN3)
大腸埃希氏桿菌組織相容性復(fù)合物RTF1抗體Anti-CTLA4 Antibody軸突蛋白2(NRXN2)
鐮刀菌核糖核苷還原1抗體Anti-CTNNA1 Antibody軸突蛋白1(NRXN1)
長根奧德菇(長根菇)環(huán)指蛋白167抗體Anti-CTH Antibody周期依賴性激抑制因子3(CDKN3)
Aquihabitans抵抗抗體Anti-CTHRC1 Antibody周期依賴性激抑制因子2A(CDKN2A)
三葉草根瘤菌Ras特異性鳥嘌呤核苷釋放因子1Anti-CTNNA1 Antibody周期依賴性激8(CDK8)
斑污擬盤多孔孢核糖體S6激RSK2抗體Anti-CTNNA1 Antibody周期依賴性激7(CDK7)
大腸埃希菌受體激活蛋白激C1抗體Anti-CTNNAL1 Antibody周期依賴性激6(CDK6)
嗜熱側(cè)孢霉孤兒核受體抗體Anti-CTSD Antibody周期依賴性激4(CDK4)
鹽古桿菌環(huán)指蛋白17抗體Anti-CTNNA1 Antibody(PB0091)周期依賴性激2(CDK2)
綿羊布魯氏菌*呼吸道合胞病抗體Anti-CTSB Antibody周期依賴性激1(CDK1)
芽孢桿菌屬周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體Anti-CTSD Antibody重肽鐵蛋白(FTH)
大腸埃希氏菌磷化周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體Anti-CTSD Antibody腫廇蛋白P63(TP63)
釀酒酵母磷化周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體Anti-CTSD Antibody(PB0020)腫瘤易感基因101(TSG101)
美澳型核果褐腐病菌磷化周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體Anti-CTSD Antibody(PB0019)腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL)
: CBS323.49資源名稱: 側(cè)耳 質(zhì)量規(guī)格:0.98
亮白曲霉Aspergillus│candidus 質(zhì)量規(guī)格:進分,sigma T7254
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,合物
MMPs抑制劑(Marimastat)腫大地桿 9-芴分泌型磷脂A2Elisa
潘諾尼亞鎖霉 PALCAM添加劑分泌型球蛋白AElisa
索氏梭 PYG液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)鈣非依賴型磷脂A2Elisa
井水螺狀 TPY瓊脂培養(yǎng)基甘油三酯Elisa
葡萄座腔屬 2,3-二羥基吡啶高密度脂蛋白Elisa
節(jié)桿 BBL瓊脂培養(yǎng)基睪酮Elisa
間型彎孢 2-氨基-3-羥基吡啶鉤端螺旋體IgG抗體Elisa
玫瑰小雙孢玫瑰亞種 2-甲氧基噻吩谷氨酰Elisa
熱帶假絲酵母 2,5-雙(4-二乙氨基苯基)-1,3,4-惡二唑過氧化Elisa
腸沙門氏腸亞種 4-苯酸骨成型蛋白15Elisa
美澳型核果褐腐病 BL瓊脂培養(yǎng)基瓜氨酸Elisa
嗜鹽芽孢桿屬 APT瓊脂過氧化脂質(zhì);乳過氧化物Elisa
哈茨木霉 乳酸桿選擇性瓊脂還原型Elisa
里氏木霉 M17肉湯核因子κBElisa
細疣籃狀 M17瓊脂核因子κB抑制蛋白αElisa