商品介紹:
Valspodar是一種p-糖蛋白(P-gp)抑制劑,被廣泛用作克服多藥耐藥性調(diào)節(jié)劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):121584-18-7 別名:PSC 833 純度:99.27% 分子量:1214.62 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:p-糖蛋白抑制劑(Valspodar)
英文名稱:Valspodar
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
大洋芽孢桿菌腎/血管緊張形成Ren1抗體Anti-CSK Antibody(PB0129)轉(zhuǎn)鈷蛋白Ⅰ(TCN1)
枯草芽孢桿菌分泌性蛋白RSPO1抗體Anti-CST3 Antibody轉(zhuǎn)谷酰7(TGM7)
死亡谷芽孢桿菌RAS的GTP激活蛋白抗體Anti-CST3 Antibody轉(zhuǎn)谷酰6(TGM6)
異常威克漢姆酵母G蛋白P21 RAC2抗體Anti-CSTA Antibody轉(zhuǎn)谷酰5(TGM5)
玉蜀黍赤霉(麥類赤霉病菌)GTP結(jié)合蛋白R(shí)AC1+RAC2抗體Anti-CSTA Antibody筑絲蛋白5(TEKT5)
裂褶菌ras癌基因家族Rab8蛋白/原癌基因c MEL抗體Anti-CSTB Antibody筑絲蛋白4(TEKT4)
大孢長(zhǎng)根菇ras癌基因家族Rab2抗體Anti-CSTA Antibody筑絲蛋白3(TEKT3)
苛求芽胞桿菌ras癌基因家族Rab3a抗體Anti-CSTB Antibody筑絲蛋白1(TEKT1)
解葡聚糖微桿菌ras癌基因家族Rab9蛋白抗體Anti-CSTB(Cystatin B) Antibody主要堿性蛋白(MBP)
紅褐肉座菌ras癌基因家族RAB20抗體Anti-CSTB(Cystatin B) Antibody蛛受體3(LPHN3)
蘋果黑腐皮殼菌Ras樣蛋白A+B抗體Anti-CSTB Antibody蛛受體2(LPHN2)
綠色木霉Rad51抗體Anti-CTAG1A Antibody蛛受體1(LPHN1)
黃絮鱗鵝膏菌RNA結(jié)合蛋白片段Y染色體家族蛋白2抗體Anti-CTBP1 Antibody肘臀蛋白(CUBN)
茄勞爾氏菌RNA結(jié)合蛋白片段Y染色體家族蛋白1抗體Anti-CTBP1 Antibody(PB0400)軸突生長(zhǎng)誘向因子G2(NtnG2)
無花果曲霉變種RNA聚合III抗體Anti-CTBP2 Antibody(PB0401)軸突生長(zhǎng)誘向因子G1(NtnG1)
土生類諾卡氏菌磷化原癌基因c-Met相關(guān)酪激抗體Anti-CTCF Antibody軸突生長(zhǎng)誘向因子5(Ntn5)
平菇Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm. 質(zhì)量規(guī)格:0.99
紅緣層孔菌Fomes│pinicola (Sw.) Fr. 質(zhì)量規(guī)格:0.98
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格:0.98
p-糖蛋白抑制劑(Valspodar)滑假絲酵母 mCPC培養(yǎng)基促性腺抑制Elisa
釀酒酵母 mCPC培養(yǎng)基添加劑催乳Elisa
靈芝 副溶血性弧瓊脂膽固Elisa
植物乳桿 吡啶-3-酸膽固7α羥化Elisa
葉點(diǎn)霉屬 副溶血性弧增液蛋白激AElisa
葡萄座腔 酵母粉葡萄糖霉瓊脂(YDC)低密度脂蛋白Elisa
枯草芽孢桿 吡啶-4-酸低氧誘導(dǎo)因子-1αElisa
Laceyella Candida抵抗Elisa
矩圓黑盤孢 DTM培養(yǎng)基端粒Elisa
米曲霉 UVM1添加劑對(duì)稱性二甲基精氨酸Elisa
假單孢 UVM培養(yǎng)基多聚球蛋白受體Elisa
燕麥?zhǔn)人嵛鞴蟻喎N* Fraser(FB2)添加劑多殺性巴氏桿Elisa
假單胞屬 雙(三苯基膦)氫化亞銅兒茶酚Elisa
蘇云金芽孢桿庫(kù)爾斯塔克亞種 改良緩沖蛋白胨水(MBP)二氧化Elisa
葡萄座腔 LPM瓊脂肥胖抑制Elisa