公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:胸苷酸合成酶抑制劑(Raltitrexed)
英文名稱:thymidylate synthase inhibitor
產品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Raltitrexed是胸苷酸合成酶(thymidylate synthase)抑制劑,同時也是一種抗代謝藥物,常用于癌癥治療。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:112887-68-0 別名:ZD1694;D1694;ICI-D1694 純度:99.21% 分子量:458.49 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
鼠李糖乳桿菌B淋巴白血病前體蛋白轉錄因子2抗體Anti-ANXA7 Antibody補體蛋白3(C3)
林生地霉B淋巴白血病前體蛋白轉錄因子4抗體Anti-AOC1 Antibody補體C5a(C5a)
凍土毛霉PUM2蛋白抗體Anti-ANXA8 Antibody補體C1q腫瘤壞死因子相關蛋白1(C1QTNF1/CTRP1)
香菇多調制因子結合蛋白1抗體Anti-AP2B1 Antibody補體C1q(C1q)
單色云芝B淋巴白血病前體蛋白轉錄因子3抗體Anti-AP2M1 Antibody補體7(C7)
Pedobacter sp.植烷氧化抗體Anti-APAF1 Antibody補體3裂解產物(C3SP)
植物乳桿菌蛋白二硫鍵異構P4HB抗體Anti-APBA3 Antibody補體1抑制物抗體-IgM(C1INH-IgM)
枯草芽孢桿菌蛋白激C抗體Anti-APBB1 Antibody補體1抑制物抗體-IgG(C1INH-IgG)
無成對螺旋細絲蛋白抗體Anti-APBB1IP Antibody補體1抑制物抗體(C1INH)
豇豆慢生根瘤菌炎癥因子3抗體(穿透)Anti-APBB1 Antibody補體1q(C1q)
孢吸水鏈霉菌山核桃樣蛋白1抗體Anti-APC Antibody玻連蛋白/體外粘連蛋白(VN/CD51+CD61)
黑曲霉磷化α型-過氧化活化增生受體抗體Anti-Apc5/ANAPC5 Antibody玻連蛋白(VTN)
大腸埃希氏菌原鈣粘蛋白γC5抗體Anti-APCS Antibody波形蛋白(VIM)
大腸埃希氏桿菌Rho鳥甘轉運蛋白抗體Anti-APEX1 Antibody酰羧化β多肽(PCCB)
路氏乳桿菌磷化蛋白激C亞性抗體Anti-APCS Antibody脫氫E1(PDH E1)
黃微綠鏈霉菌磷化蛋白激C亞性D型抗體Anti-APEX1 Antibody(PB0097)激R型同工(R-PK)
葡萄座腔菌Botryosphaeria│dothidea (Moug.) Ces. & De Not. 質量規(guī)格:>98%,標準品
貝倫格葡萄座腔菌Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 質量規(guī)格:>98%,BR
蕈狀芽孢桿菌Bacillus│mycoides Flügge 質量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品
胸苷酸合成酶抑制劑(Raltitrexed)鼠乳桿 BAT培養(yǎng)基半胱氨酸蛋白8Elisa
釀酒酵母 消液中和肉湯受體TNFRSF結合絲氨酸蘇氨酸激1Elisa
小馬勃 沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(含霉)受體TNFRSF結合絲氨酸蘇氨酸激3Elisa
可可毛色二孢 水稻水培養(yǎng)液球蛋白G抗體Elisa
紫穗槐根瘤 水稻赤霉培養(yǎng)基分泌型球蛋白A抗體Elisa
藤黃微球 4-氨基-3-羥基Runt相關轉錄因子2Elisa
不解糖氨單胞 采樣吸收液1-GVPC液體培養(yǎng)基脂聯受體Elisa
黃柄籠頭 FWA淡水魚類瓊脂培養(yǎng)基胰島樣生長因子結合蛋白3Elisa
擬莖點霉 BG11培養(yǎng)基食欲受體Elisa
假紅桿屬 2-氟-5-促胃液受體Elisa
多根硬皮馬勃 ISP培養(yǎng)基前蛋白轉化枯草溶9Elisa
巨孢犁頭霉 草酸兔血漿3-羥-3-甲戊二酸單酰還原Elisa
Bionectria 雙料月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯(LST)低密度脂蛋白受體Elisa
腸沙門氏浩敦亞種 2-氟-3-膽固轉運蛋白Elisa
黃色孢鏈霉 志賀氏增肉湯-新生霉過氧化物體增殖因子活化受體γElisa