公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:血小板源生長因子受體(PDGFR)抑制劑
英文名稱:CP-673451
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
CP-673451是一種有效的,選擇性的血小板源生長因子受體(PDGFR)抑制劑,抑制PDGFRα和PDGFRβ的活性,IC50值分別為10和1nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:343787-29-1 純度:99.65% 分子量:417.5 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
戴爾根霉囊泡乙酰通道抗體Anti-MED4 Antibody趨化因子C-X3-C-基元受體1(CX3CR1)
魯考弗美奇酵母含纈酪肽蛋白抗體Anti-MED8 Antibody趨化因子C-C-基元受體7(CCR7)
凝結(jié)芽孢桿菌等電壓依賴性陰離子通道抗體Anti-MED9 Antibody趨化因子C-C-基元受體6(CCR6)
皺環(huán)球蓋菇磷化血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體Anti-MEF2C Antibody趨化因子C-C-基元受體5(CCR5)
栗色鏈霉菌信號通路Wnt1抗體Anti-MEF2A Antibody趨化因子C-C-基元受體4(CCR4)
禽腦脊髓炎病信號通路Wnt3a抗體Anti-MEFV Antibody趨化因子C-C-基元受體3(CCR3)
香菇磷化WEE1蛋白抗體Anti-MEIS1 Antibody趨化因子C-C-基元受體2(CCR2)
栗酒裂殖酵母WDFY3蛋白抗體Anti-MEK2/MAP2K2 Antibody趨化因子C-C-基元受體1(CCR1)
枯草芽孢桿菌WBP2蛋白抗體Anti-MEKK2/MAP3K2 Antibody趨化因子C-C-基元配體3樣蛋白1(CCL3L1)
緣毛殼Wnt蛋白家族7B抗體Anti-MEN1 Antibody趨化因子C-C-基元配體14(CCL14)
貪銅菌(加詞待譯)WASF2抗體Anti-MERTK Antibody趨化(CHEM)
大腸埃希菌WNT蛋白家族Wnt8b抗體Anti-MEN1 Antibody驅(qū)動(dòng)結(jié)合蛋白1(KTN1)
大腸埃希氏桿菌轉(zhuǎn)錄因子WSTF抗體Anti-MESP1 Antibody驅(qū)動(dòng)結(jié)合蛋白(KNCN)
變金黃節(jié)桿菌信號通路WNT8A抗體Anti-Mesp2 Antibody驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員5A(KIF5A)
球孢白僵菌信號通路Wnt2抗體Anti-MET Antibody驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員20A(KIF20A)
煙色紅曲霉信號通路Wnt4抗體Anti-MET Antibody驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員1A(KIF1A)
人心肌肌凝蛋白平滑肌小鼠單抗Streptomycesscabiei大鼠皮下脂肪細(xì)胞
S100鈣結(jié)合蛋白A10抗體腸沙門氏菌腸亞種鼠傷寒血清型大鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞
唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集14抗體黃短桿菌大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞
染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白1抗體日溝維腸桿菌大鼠表皮黑色細(xì)胞
血小板源生長因子受體(PDGFR)抑制劑磷礦叢毛單胞 酮肟脂肪Elisa
紅曲霉 丁二酮肟脂肪酸合成Elisa
巨型艾美耳球蟲 亞碲酸腫瘤壞死因子αElisa
煙曲霉橢孢變種 亞鉑酸轉(zhuǎn)鐵蛋白Elisa
乳酸乳球乳酸亞種 鉑酸總膽固Elisa
聚生殼 四酸總膽汁酸Elisa
暗黑鏈霉 硅酸組Elisa
側(cè)孢短芽孢桿 亞硝基鐵組織蛋白DElisa
球孢白僵 偏重亞硫酸組織蛋白LElisa
韓國游動(dòng)微 焦硫酸β干擾Elisa
微黃棒桿 亞鐵縮Elisa
腐皮殼 鐵酮酸激Elisa
淺絳紅鏈霉 乙基黃原酸基質(zhì)金屬蛋白9Elisa
溜曲霉 無水磷酸氫二乙酰Elisa
韋伯靈芝 磷酸氫二抗平滑肌抗體Elisa