公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:JAK3抑制劑(Tofacitinib citrate)
英文名稱:Tofacitinib citrate
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Tofacitinib citrate抑制JAK3,IC50為1nM,而抑制JAK2,JAK1,Rock-II和Lck,IC50分別為20nM,112nM,3400nM和3870nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:540737-29-9 別名:Tasocitinib citrate;CP-690550 citrate 純度:99.92% 分子量:504.49 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
升麻(標準品)英文名稱: (R)-(+)-Corypalmine髓磷酯髓鞘蛋白1抗體包裝5g
升麻苷(標準品)英文名稱: D-Pinitol巨噬克激因子抗體包裝1g
升麻-3-O-α-L-拉伯糖苷(標準品)英文名稱: Echinacoside膜相關環(huán)指蛋白4抗體包裝250mg
生脈提取物(標準品)英文名稱: Usnic acid肌球蛋白輕鏈激抗體包裝1g
勝紅薊(標準品)英文名稱: Jujuboside A單紡錘體蛋白激1抗體包裝25g
圣草次苷(標準品)英文名稱: Jujuboside B有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白2抗體包裝5g
圣草酚(標準品)英文名稱: Amentoflavone單氧化B抗體包裝100g
蓍草(標準品)英文名稱: Hupehenine微小染色體維持缺陷蛋白4抗體包裝25g
十七碳酯(標準品)英文名稱: Specnuezhenide自噬微管相關蛋白輕鏈3抗體包裝500g
石菖蒲(標準品)英文名稱: Gastrodin髓鞘基因調(diào)控因子抗體包裝5ml
石吊蘭(標準品)英文名稱: Gastrodin肌球蛋白結合蛋白C抗體包裝1g
石吊蘭英文名稱: Stevioside磷化絲裂原活化蛋白激磷1抗體包裝25g
石斛酚(標準品)英文名稱: Tubeimoside I促代謝型谷受體2抗體包裝5g
石斛堿(標準品)英文名稱: Pseudolaric Acid B代謝型谷受體-3抗體包裝1g
石見穿(標準品)英文名稱: Alantolactone巨噬炎癥蛋白2( GROβ)抗體包裝5g
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:效價測定抗IL6自身抗體ELISA Kit大黃;Emodin-3-methy
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>1500U/mg,USP,BR抗IgE受體抗體ELISA Kit大車前苷;plantamajoside
鼻疽伯克霍爾德氏菌Burkholderia│mallei 質(zhì)量規(guī)格:效價測定抗IgA抗體試劑盒丹皮酚;Paeonol
JAK3抑制劑(Tofacitinib citrate)質(zhì)粒小量提取試劑盒香草(標準品)Human, Mouse, Rat
凝膠回收試劑盒香橙(標準品)Human
DNA產(chǎn)物純化試劑盒(標準品)Human, Mouse
植物因組提取試劑盒香蜂草苷(標準品)Human
細菌因組提取試劑盒香附(標準品)Human, Mouse
動物/組織因組提取試劑盒香加皮(標準品)Human, Mouse, Rat
T4 DNA連接香荊芥酚(標準品)Human, Mouse
T4 DNA連接香蒲新苷(標準品)Human, Mouse, Rat
T4 DNA 激香薷(標準品)Human, Mouse