產(chǎn)品屬性:
中文名稱:GPR119受體激動(dòng)劑(PSN632408)
英文名稱:PSN632408
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
PSN632408是GPR119受體激動(dòng)劑,與內(nèi)源性配體OEA活性接近,對重組型鼠和人的GPR119受體的EC50分別為5.6和7.9uM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:857652-30-3 純度:99.13% 分子式:C??H??N?O? 分子量:360.41 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
枯草芽孢桿菌G蛋白偶聯(lián)受體G2A抗體Human USP21 ELISA Kit大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體3(TRAIL-R3)免疫試劑盒
嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌G蛋白偶聯(lián)受體1抗體Human USP20 ELISA Kit大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體1(TRAIL-R1)免疫試劑盒
紅菇屬G蛋白偶聯(lián)受體100抗體Human USH1G ELISA Kit大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL)免疫試劑盒
亮葉耳環(huán)根瘤菌G蛋白偶聯(lián)受體101抗體Human USP22 ELISA Kit大鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員11A(TNFRSF11A/RANK)免疫試劑盒
球孢白僵菌G蛋白偶聯(lián)受體103抗體Human USHBP1 ELISA Kit大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)免疫試劑盒
長枝木霉G蛋白偶聯(lián)受體110抗體Human VPS33A ELISA Kit大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)免疫試劑盒
豌豆根瘤菌G蛋白偶聯(lián)受體12抗體Human DOK6(Docking protein 6) ELISA Kit大鼠腫瘤壞死因子γ(TNF-γ)免疫試劑盒
毛栓孔菌腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)志物/G蛋白偶聯(lián)受體124抗體Human VPS33B ELISA Kit大鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)免疫試劑盒
根霉屬的菌G蛋白偶聯(lián)受體58抗體Human VPS34(Phosphatidylinositol 3-kinase catalytic subunit type 3) ELISA Kit大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒
地衣芽胞桿菌G蛋白偶聯(lián)受體128抗體Human LMNB1(Lamin-B1) ELISA Kit大鼠腫瘤壞死因子(配體)超家族成員14(TNFSF14)免疫試劑盒
旋柄腐霉G蛋白偶聯(lián)受體128抗體Human VPS35(Vacuolar protein sorting-associated protein 35) ELISA Kit大鼠中性粒趨化因子(CINC)免疫試劑盒
米曲霉G蛋白偶聯(lián)受體146抗體Human VPS37A ELISA Kit大鼠中性粒明膠相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)免疫試劑盒
鏈格孢G蛋白偶聯(lián)受體146抗體Human VPS11 ELISA Kit大鼠中性粒彈性蛋白(NE)免疫試劑盒
平滑假絲酵母G蛋白偶聯(lián)受體17抗體Human VPS39 ELISA Kit大鼠質(zhì)膜鈣ATP(PMCA)免疫試劑盒
釀酒酵母G蛋白偶聯(lián)受體19抗體Human VPS15 ELISA Kit大鼠脂氧A4(LXA4)免疫試劑盒
生孢梭菌G蛋白偶聯(lián)受體20抗體Human VPS41 ELISA Kit大鼠脂酰合成(ACS)免疫試劑盒
微桿菌Microbacterium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:藥用級,325目硫長春質(zhì)堿
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:砂PH(25℃):9.18長春質(zhì)堿
淺青紫鏈霉菌Streptomyces lividans 質(zhì)量規(guī)格:0.98長春堿
GPR119受體激動(dòng)劑(PSN632408)23-羥基龍吉苷元英文名稱: Oxaloacetic acid磷化絲裂原活化蛋白激1/2抗體包裝5g
23-乙酰去氫澤瀉B英文名稱: Zinc sulfate, heptahydrate電子轉(zhuǎn)移黃蛋白α抗體包裝25g
23-乙酰澤瀉B;澤瀉B醋酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Potassium sodium tatrate, tetrahydrate前列腺E受體蛋白4抗體包裝5g
24-乙酰澤瀉F英文名稱: Biuret風(fēng)疹病糖蛋白抗體包裝1g
25(S)-魯斯可皂苷元-1-O-α-L-吡喃鼠李糖基...英文名稱: Magnesium sulfate anhydrousEFR3A蛋白抗體包裝5g
25-脫澤瀉A;澤瀉G(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Quartz sandENAH蛋白抗體包裝1g
26-脫氧升麻苷英文名稱: 3-AT乙基二腦病蛋白抗體包裝5g
28-O-順芷?;赘傩萝赵⑽拿Q: Sodium phosphate, tribasic, dodecahydrate轉(zhuǎn)錄因子E2F-3抗體包裝10MG
28-去基-β-香樹脂英文名稱: Sodium phosphate, dibasic, anhydrous轉(zhuǎn)錄因子E2F-5抗體包裝100ml
28-去基-β-香樹脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: FerrozineDNA切除修復(fù)蛋白1抗體包裝25ml
2’-乙酰基毛蕊花糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sodium acetate, trihydrate轉(zhuǎn)錄因子E2F6抗體包裝1g
2"-O-沒食子?;鸾z桃苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Thidiazuron膠質(zhì)谷運(yùn)載蛋白2抗體包裝25g
3"-O-基表沒食子兒茶沒食子酯英文名稱: Iodine膠質(zhì)谷運(yùn)載蛋白3抗體(神經(jīng)/上皮谷運(yùn)載蛋白)包裝5g
3',4',5',5,7-五氧基黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: ADA, Alcohol dehydrogenase 內(nèi)皮轉(zhuǎn)化2抗體包裝1g
3',4',7-三羥基黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tween-80嗜性粒陽離子蛋白抗體包裝5g
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)