商品介紹:
Crizotinib hydrochloride是一種有效的c-Met/ALK抑制劑,細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中IC50分別為11nM,24nM 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1415560-69-8 別名:PF-02341066 hydrochloride 純度:99.86% 分子量:486.8 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:c-Met/ALK抑制劑
英文名稱:Crizotinib hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
米氏假單胞菌磷化鳥嘌呤核苷交換因子VAV3抗體Anti-MCU Antibody固合(ALDOS)
季也蒙假絲酵母囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)蛋白A抗體Anti-MCM7 Antibody(PB0260)全色C合(HCCS)
克魯維畢赤酵母癌基因VAV2抗體Anti-MDM2 Antibody全羧合成(HLCS)
枯草芽孢桿菌囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)的蛋白BAnti-MDM4 Antibody去唾液糖蛋白受體2(ASGR2)
土生類諾卡氏菌低密度脂蛋白受體抗體Anti-MDK Antibody去唾液糖蛋白受體1(ASGPR1)
果瘡痂芽枝霉神經(jīng)視錐蛋白樣1抗體(神經(jīng)鈣蛋白)Anti-MDM2 Antibody去甲腎上腺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(NET)
釀酒酵母轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白2抗體Anti-MDC1 Antibody去泛化3(DUB3)
動(dòng)球菌轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白4抗體Anti-MED14 Antibody去精加壓(DDAVP)
糖螺菌絲/蘇特定蛋白磷抗體Anti-MECP2 Antibody趨化因子C-基元受體1(XCR1)
不規(guī)則分枝發(fā)簇孢血管生長(zhǎng)因子VG5Q抗體Anti-MED13 Antibody趨化因子C-基元配體2(XCL2)
無花果沙雷氏菌上皮型鈣粘附分子抗體Anti-ME2 Antibody趨化因子C-X-C-基元受體7(CXCR7)
米堆冰川居真菌細(xì)菌囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1家族蛋白抗體Anti-MED15 Antibody趨化因子C-X-C-基元受體6(CXCR6)
薄花邊傘6-2液泡分選蛋白4抗體Anti-MED20 Antibody趨化因子C-X-C-基元受體5(CXCR5)
蘑菇線粒體外膜孔蛋白3抗體(電壓依賴陰離子通道蛋白3)Anti-MED18 Antibody趨化因子C-X-C-基元受體4(CXCR4)
小單孢菌視覺抑制蛋白抗體Anti-MED4 Antibody趨化因子C-X-C-基元受體3(CXCR3)
異配囊接霉血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體3抗體Anti-MED6 Antibody趨化因子C-X-C-基元配體16(CXCL16)
血清應(yīng)答因子抗體腦膜炎奈瑟菌大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞
蛋白抑制劑14抗體白色鏈霉菌白色亞種大鼠視網(wǎng)膜色上皮細(xì)胞
分泌受體抗體Lentzeasp大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞
鈉-糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1抗體帶小棒鏈霉菌大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞
c-Met/ALK抑制劑釀酒酵母 碳酸錳胰島Elisa
凝結(jié)芽孢桿 硫酸錳胰島樣生長(zhǎng)因子1Elisa
擬莖點(diǎn)霉 硬脂酸鈣胰島樣生長(zhǎng)因子2Elisa
乳酸乳球霍氏亞種 草酸鈣胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-1Elisa
球蓋蟻巢傘 乙酸鈣胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-3Elisa
宇佐美曲霉 無水硫酸鈣胰高血糖Elisa
Kocuria polaris 硫酸鈣乙酰CoA羧化Elisa
冬蟲夏草 焦磷酸鈣乙酰CoA羧化αElisa
金針菇 磷酸三鈣乙酰CoA羧化βElisa
枯草芽孢桿 磷酸二氫鈣異檸檬酸脫氫Elisa
根瘤 過磷酸鈣硬脂酰去飽和1Elisa
枯草芽孢桿枯草亞種 氫氧化鈣游離膽固Elisa
硬水黃桿 碳酸鈣孕酮Elisa
香草蘭根疾 磷酸氫鈣脂蛋白脂Elisa
赤紅球 二甲基亞砜脂肪甘油三酯脂Elisa