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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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15026555973 |
| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-21 12:09:42瀏覽次數(shù)：228
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 20 rxn |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X9626 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 公司產(chǎn)品僅供科研 | 英文名稱 | TUNEL Apoptosis Detection Kit (Alexa Fluor 647) |
商品介紹：
本試劑盒應(yīng)用范圍廣，可以用于檢測冷凍或石蠟切片中的細(xì)胞凋亡情況，也可以檢測培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞的凋亡情況。 細(xì)胞在發(fā)生凋亡時(shí)，會激活一些DNA內(nèi)切酶，這些內(nèi)切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細(xì)胞凋亡時(shí)抽提DNA進(jìn)行電泳檢測，可以發(fā)現(xiàn)180-200bp的DNA ladder。 TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling) 細(xì)胞凋亡檢測試劑盒（Alexa Fluor 647）可以用來檢測組織細(xì)胞在凋亡晚期過程中細(xì)胞核DNA的斷裂情況。其原理是在末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶（Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT）的作用下，在基因組DNA斷裂時(shí)暴露出的3′-羥基（3′-OH）末端摻入Alexa Fluor 647-12-dUTP，從而可以用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測。Alexa Fluor 647為紅色熒光染料，具有很高的穩(wěn)定性和很強(qiáng)的亮度。 試劑盒組份： 5×Equilibration Buffer——————————1.25 ml Alexa Fluor 647-12-dUTP Labeling Mix———100 μl Recombinant TdT Enzyme——————————20 μl Proteinase K(2 mg/ml)———————————40 μl 注意事項(xiàng) 1) 需自備用于洗滌細(xì)胞的PBS，用于封片的抗熒光淬滅封片液，用于固定的4%多聚。 2) 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 儲存條件：-20℃，有效期一年。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
TUNEL Apoptosis Detection Kit (Alexa Fluor 647) | 20 rxn | 1～3天 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
上皮中性粒細(xì)胞激活肽78(ENA78)英文名稱：ENA78 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白25抗體包裝500mg
上皮性鈣黏附蛋白(CDHE)英文名稱：CDHE ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28A抗體包裝1g
上皮型脂肪結(jié)合蛋白(FABP5)英文名稱：FABP5 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28B抗體包裝5g
殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)英文名稱：BPI ELISA Kit腫瘤/抗原74抗體包裝1g
色胺羥化2(TPH2)英文名稱：TPH2 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白38抗體包裝25g
色胺羥化1(TPH1)英文名稱：TPH1 ELISA Kit7號染色體開放閱讀框72抗體包裝5g
三葉因子3(TFF3)英文名稱：TFF3 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白42抗體包裝100g
三葉因子2(TFF2)英文名稱：TFF2 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體包裝25g
三肽基肽Ⅰ(TPP1)英文名稱：TPP1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白43抗體包裝5g
三磷腺苷(ATP)英文名稱：ATP ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白46抗體包裝1g
三磷肌(IP3)英文名稱：IP3 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白63抗體包裝1g
朊病毒蛋白(PRNP)英文名稱：PRNP ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白54抗體包裝5g
軟骨關(guān)聯(lián)蛋白(CRTAP)英文名稱：CRTAP ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白61抗體包裝100ml
軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)英文名稱：COMP ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體包裝25ml
乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)英文名稱：MFGE8 ELISA Kit神經(jīng)酰激CERK抗體包裝100g
: AS3.2783資源名稱: 泡盛曲霉 質(zhì)量規(guī)格：純度> 98%,BR，可用于培養(yǎng)轉(zhuǎn)化生長因子β激蛋白22試劑盒紫檀芪;Pterostilbene
平滑假絲酵母Candida│parapsilosis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品轉(zhuǎn)化生長因子β3試劑盒竹節(jié)參皂苷IVa;Chikusetsu
普通變形桿菌Proteus│vulgaris 質(zhì)量規(guī)格：純度>98%,BR,可用于培養(yǎng)轉(zhuǎn)化生長因子β2試劑盒梓酚;Catalponol
TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(Alexa Fluor 647)枯草芽孢桿 2,3-二羥基萘-6-磺酸鈉血管內(nèi)皮生長因子受體1Elisa
釀酒酵母 雙氯芬酸血管內(nèi)皮生長因子受體2Elisa
枯草芽孢桿 2-氨基-4-溴甲酯血管內(nèi)皮粘附分子1Elisa
熱帶假絲酵母 一氯頻哪酮血管內(nèi)皮抑Elisa
溜曲霉 2-氨基-3-溴吡啶血管黏附蛋白Elisa
棲藻海桿狀 3-基甲酯血管生成1Elisa
西蕃蓮莖基腐病 (S)-(-)-Alpha-氨基-Gamma-丁內(nèi)酯鹽血管生成2Elisa
芽孢桿 高氯酸鎳(II)六水合物, Reagent Grade血管生成受體酪氨酸激2Elisa
山柑芽孢桿 Fmoc-L-正纈氨酸血管生成樣蛋白2Elisa
假單胞屬 2-甲基-4-硝基吡啶血管生成樣蛋白3Elisa
繩狀籃狀 2-苯甲酰噻吩血管生長Elisa
Bacillus 氯(4-)苯血管性血友病因子Elisa
金針菇—HP3 六水合磷酸鎂銨血紅蛋白Elisa
黑孢霉 酸鎳六水合物血紅蛋白CElisa
大腸埃希 氯化釹六水合物血紅蛋白FElisa
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