商品介紹:
AM580是一種穩(wěn)定的retinobenzoic衍生物,是RARα的激動劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:102121-60-8 別名:CD336;NSC608001;Ro 40-6055 純度:99.41% 分子量:351.44 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
RARα激動劑(AM580) | AM580 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
慢生根瘤菌富含亮重復(fù)蛋白25抗體Human PAPSS2 ELISA Kit髓樣分化因子88(MyD88)
四川散斑殼白介31受體a抗體Human PAR2 ELISA Kit髓樣分化蛋白2(MD-2)
中國擬迷孔菌LRSAM1蛋白抗體Human PARD3 ELISA Kit髓性核分化抗原(MNDA)
波蘭青霉LIM結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Human PARD6B ELISA Kit髓系觸發(fā)受體-1(TREM-1)
叢毛單胞菌乳菌菌體表面蛋白抗體Human PARN ELISA Kit髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)
日本根霉透明質(zhì)受體抗體Human PARD3 ELISA Kit髓鞘相關(guān)糖蛋白(MAG)
香菇白三烯A4水解抗體Human PARP10 (Poly [ADP-ribose] polymerase 10) ELISA Kit髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)
耐熱芽孢芽孢桿菌肝臟X受體抗體Human PAMR1 ELISA Kit髓鞘堿性蛋白抗體(MBP antibody)
異常畢赤酵母溶體蛋白跨膜β4抗體Human PAN2 ELISA Kit髓鞘蛋白P0(MPZ)
枯草芽孢桿菌富含亮重復(fù)神經(jīng)元5抗體Human BRCA1(Breast cancer type 1 susceptibility protein) ELISA Kit髓磷脂堿性蛋白(MBP)
蠟狀芽孢桿菌親脂性蛋白B抗體Human PANK1 ELISA Kit髓磷脂P2蛋白(PMP2)
芽胞桿菌癌癥亮拉鏈下調(diào)因子1抗體Human PANK2 ELISA Kit髓過氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)
噬幾丁質(zhì)菌屬賴酰氧化相關(guān)蛋白2抗體Human PAICS(Multifunctional protein ADE2) ELISA Kit髓過氧化物(MPO)
湖泊黃桿菌基膜聚糖蛋白抗體Human PAGE2 ELISA Kit性鐵蛋白(AIF)
側(cè)孢短小芽胞桿菌李斯特菌溶胞抗體Human PANK3 ELISA Kit性神經(jīng)鞘磷脂(ASM)
少根根霉亮羧基轉(zhuǎn)移1抗體Human PAIP1 ELISA Kit性磷(ACP)
叢毛單胞菌Comamonas│testosteroni 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)人參皂苷Rb2
嗜熱脂肪地芽抱桿菌Geobacillus│stearothermophilus 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(T)人參皂苷Rb1
海迪茨氏菌Dietzia│maris 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)擬人參皂苷F11
RARα激動劑(AM580)球孢白僵 1-溴-3-苯氨基己糖Elisa
嗜鐵鉤端螺 2,3-二甲基吡衣原體抗體Elisa
釀酒酵母 乙酰脲β-乳球蛋白Elisa
枯草芽孢桿 2-丁炔酸皮膚T虜獲趨化因子Elisa
淡紫擬青霉 1-甲基環(huán)己D二聚體Elisa
植物乳桿 溴乙表皮角蛋白Elisa
假單胞 4-甲基環(huán)己酮蛋白激AElisa
芽孢桿屬 1-溴-4-苯性結(jié)合球蛋白Elisa
栗疫 2-芐氧基苯甲甘油二酯O-?;D(zhuǎn)移Elisa
草木樨中華根瘤 1,4-苯二甲乙酰CoA羧化Elisa
大腸埃希氏桿 4-甲基芐酯酰CoA脫氫Elisa
云芝* 2-苯氧基溴乙烷結(jié)核抗體Elisa
蘇云金芽胞桿 對溴苯乙趨化因子1Elisa
嗜水氣單孢 4-溴正苯趨化因子6Elisa
巴氏醋桿 6-煙酰趨化因子8Elisa