產(chǎn)品屬性:
中文名稱:HDAC6抑制劑
英文名稱:Tubastatin A Hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Tubastatin A Hydrochloride是一種有效的,選擇性的HDAC6抑制劑,IC50值為15nM,對其選擇性是HDAC8外的其他亞型的1000多倍。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1310693-92-5 別名:Tubastatin A HCl;TSA HCl 純度:97.32% 分子量:371.86 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大腸埃希氏菌血管擴(kuò)張激磷蛋白抗體Anti-MBD2 Antibody溶血磷脂Ⅰ(LYPLA1)
球孢白僵菌磷化血管擴(kuò)張激磷蛋白抗體Anti-MBD4 Antibody溶神經(jīng)(NLN)
枯草芽孢桿菌磷化血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體Anti-MBD2 Antibody溶體性磷2(ACP2)
松鼠葡萄球菌松鼠亞種磷化血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體Anti-MBD4 Antibody溶體關(guān)聯(lián)膜蛋白2(LAMP2)
藤倉赤霉磷化血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體Anti-MBL2 Antibody溶體關(guān)聯(lián)膜蛋白1(LAMP1)
豬丹絲菌血管內(nèi)皮粘附分子抗體Anti-MBP Antibody絨毛膜促性腺激α肽(CGα)
梨形游動放線菌纈抗體Anti-MBNL1 Antibody絨毛膜促性腺激(CG)
單色云芝血管粘附蛋白1抗體Anti-MBL2 Antibody絨毛蛋白1(VIL1)
釀酒酵母間粘附蛋白Vinexin抗體Anti-MC1R Antibody相關(guān)血漿蛋白A2(PAPPA2)
彩色豆馬勃波形蛋白抗體Anti-MC3R Antibody特異性β1-糖蛋白(PSG1)
人參土獨島桿菌維生A抗體Anti-MC2R Antibody關(guān)聯(lián)血漿蛋白A(PAPPA)
栗疫菌蛋白聚糖Versican抗體Anti-MCAM Antibody帶蛋白(PZP)
芽孢桿菌屬VWCE抗體Anti-MC4R Antibody17-β-羥基類固脫氫14(HSD17β14)
紅曲紅曲視神經(jīng)視網(wǎng)膜相關(guān)蛋白VAX1抗體Anti-MCAM Antibody熱休克轉(zhuǎn)錄因子4(HSF4)
枯草芽孢桿菌枯草亞種視神經(jīng)視網(wǎng)膜相關(guān)蛋白VAX2抗體Anti-MCL1 Antibody熱休克轉(zhuǎn)錄因子2(HSF2)
休哈塔假絲酵母維生D3受體抗體Anti-MCM2 Antibody熱休克轉(zhuǎn)錄因子1(HSF1)
第10號染色體開放閱讀框27抗體樹干畢赤酵母大鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞
SH2B蛋白抗體裂褶菌(斜面)大鼠腦膜成纖維細(xì)胞
環(huán)指蛋白142抗體非脫羧勒克菌大鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞
SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體燕麥?zhǔn)尘帑渷喎N大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞
HDAC6抑制劑龍勝鏈霉 對異基苯神經(jīng)肽YElisa
植物乳桿 糖精生長促乳Elisa
Aurantimonas altamirensis 二十五烷生長Elisa
腸桿 二苯硫生長受體Elisa
牛絲膜 十六烯生長抑Elisa
淺黃色假單胞 乙烯硫脲瘦Elisa
釀酒酵母 4,4'-二二苯甲酮絲氨酸蛋白Elisa
云芝栓孔(變色栓) D-異抗壞血酸酸性磷酸Elisa
灰略紅鏈霉 鄰苯二甲酸丁芐酯糖原合成Elisa
黑附球 鄰三聯(lián)苯糖原合成激Elisa
香栓孔 分散橙糖原磷酸化Elisa
擬蠶豆葡萄孢 螺旋霉天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移Elisa
Carnobacterium 4,4'-二氨基二苯砜脫Elisa
突孢毛殼 氟羅沙星脫1Elisa
假單胞屬 4-羥基苯甲脫2Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)