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nephrin腎病蛋白ELISA Kit

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具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 型號 48T/96T
  • 品牌 其他品牌
  • 廠商性質 經銷商
  • 所在地 上海市

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更新時間:2021-04-14 14:31:33瀏覽次數:254

聯系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

CAS 詳見說明書 純度 詳見說明書
分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
供貨周期 現貨 規(guī)格 48T/96T
貨號 GOY-E99698 應用領域 化工
主要用途 公司產品僅用于科研    
nephrin腎病蛋白ELISA Kit不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

詳細介紹

實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數。

ELISA Kit檢測試劑盒優(yōu)點多,更加方便我們的科研學者進行科學實驗,是科研實驗的好伙伴。

產品名稱

英文名稱

貨號

nephrin腎病蛋白ELISA Kit

Nephrin ELISA Kit

GOY-E99698

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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。

1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
注意事項:
1.加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”,因此盡量采用水??;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復合物脫離;
②洗板機洗板時應經常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數;
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結果要在15-30 min內完成,定性測定用肉眼判讀試驗結果時,反應板應水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結果,酶標儀不應置于陽光或強光照射下,需先預熱15-30 min再進行測試。

雞抗膠原蛋白抗體(CLA)酶聯免疫吸附測定試劑盒

雞纖維蛋白原相關蛋白1(FGL1)酶聯免疫吸附測定試劑盒

雞增殖相關蛋白2G4 (PA2G4)酶聯免疫吸附測定試劑盒

雞血管生成素樣蛋白2(ANGPTL2)酶聯免疫吸附測定試劑盒  

β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1 Ab IgA)酶聯免疫吸附測定試劑盒

雞外顯肽(Extein)酶聯免疫吸附測定試劑盒

雞速激肽受體3(TACR3)酶聯免疫吸附測定試劑盒

雞抗乙酰膽堿受體抗體(Anti-AChR)酶聯免疫吸附測定試劑盒

雞細胞因子受體樣因子1(CRLF1)酶聯免疫吸附測定試劑盒

雞膽囊收縮素/腸促胰酶肽B受體(CCKBR)酶聯免疫吸附測定試劑盒

雞多聚蛋白1(MMRN1)酶聯免疫吸附測定試劑盒

雞腺苷酸環(huán)化酶1(ADCY1)酶聯免疫吸附測定試劑盒

雞亮氨酸豐富α2糖蛋白1(LRG1)酶聯免疫吸附測定試劑盒

Smad同源物1 (Smad1/MADH1)酶聯免疫吸附測定試劑盒

nephrin腎病蛋白ELISA KitABCF1  ATP結合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體 0.1ml

Phospho-Caspase-9 (Tyr153)  磷酸化半胱氨酸蛋白酶9抗體 規(guī)格: 0.1ml

E2F4  轉錄因子E2F-4抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-ADRB2 (Ser261)  磷酸化上素能受體β2抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-Bov IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的兔抗牛IgG  規(guī)格: 0.1ml

ARNT2   芳香烴受體核轉錄蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

PANK4  泛酸激酶4抗體 規(guī)格: 0.2ml

CACNB1  鈣通道電壓依賴性β1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

GAPDH  3-磷酸甘油醛脫酶(兔來源免疫組化用抗體) 規(guī)格: 0.1ml

CDK9/Cyclin T1  周期素依賴性激酶9抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit anti-MG IgG/FITC  FITC標記的兔抗爪沙鼠IgG 規(guī)格: 0.3ml

phospho-NFKBIE (Ser157)  磷酸化KB抑制蛋白激酶ε 規(guī)格: 0.1ml

ENTPD5/CD39L4  原基因CD39樣蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml

BMP11  骨形態(tài)發(fā)生蛋白11抗體 規(guī)格: 0.2ml

使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。*,酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導大量的催化反應,產生可供觀察的顯色反應現象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。   24μg/ml    5號標準品    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
 12μg/ml    4號標準品    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
 6μg/ml     3號標準品    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
 3μg/ml     2號標準品    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
 1.5μg/ml   1號標準品    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

 

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