商品介紹:
Tariquidar methanesulfonate,hydrate是一種有效的特異性P-glycoprotein(P-gp)抑制劑,Kd為5.1±0.9nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):625375-83-9 別名:XR9576 純度:98.02% 分子量:892.99 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:P-糖蛋白抑制劑
英文名稱:Tariquidar methanesulfonate, hydrate
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
冠突曲霉染色體分離調(diào)節(jié)蛋白1抗體Anti-COL1A1 Antibody組蛋白脫乙?;?(HDAC7)
Mucilaginibacter mallensis復(fù)制激活因子C1抗體Anti-COL3A1 Antibody組蛋白脫乙?;?(HDAC6)
釀酒酵母復(fù)制激活因子C2抗體Anti-COL3A1 Antibody組蛋白脫乙?;?(HDAC5)
孟氏假單胞菌B淋巴受體相關(guān)蛋白抗體Anti-COL2A1 Antibody組蛋白脫乙?;?(HDAC4)
透孢犁頭霉磷化急性髓白血病1蛋白抗體Anti-COL3A1 Antibody組蛋白脫乙?;?(HDAC3)
黑腐皮殼菌受體結(jié)合絲蘇激3抗體Anti-COL4A1 Antibody組蛋白脫乙?;?(HDAC2)
衛(wèi)矛擬盤(pán)多毛孢胰島單克抗體Anti-COL4A2 Antibody組蛋白脫乙?;?1(HDAC11)
細(xì)鏈格孢磷化視網(wǎng)膜母瘤相關(guān)蛋白1抗體Anti-COMT Antibody組蛋白脫乙?;?0(HDAC10)
蘋(píng)果鏈格孢磷化視網(wǎng)膜母瘤相關(guān)蛋白1抗體Anti-COMP Antibody組蛋白脫乙?;?(HDAC1)
小青霉精神分裂癥相關(guān)蛋白9抗體Anti-COL4A1 Antibody(PB0126)組蛋白H4(H4)
雙孢蘑菇周期依賴性激抑制相關(guān)蛋白抗體Anti-COL4A1 Antibody組蛋白H3(H3)
大腸埃希菌RNA結(jié)合蛋白38抗體Anti-COMT Antibody(PB0568)組蛋白H2B(H2B)
青色鏈霉菌松弛肽/松弛抗體Anti-COMT Antibody組蛋白H2A(H2A)
褐疣柄牛肝菌腎抗體Anti-Connexin 37/GJA4 Antibody組蛋白H1(H1)
枯草芽孢桿菌環(huán)指蛋白20抗體Anti-Connexin 43/GJA1 Antibody組-N-甲基轉(zhuǎn)移(HNMT)
新城疫病RAN結(jié)合蛋白1抗體Anti-Connexin-40(GJA5) Antibody組H4受體(HRH4)
曲霉Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
鹽單胞菌Halomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
45262=CCTCCAA208050=YIM10002資源名稱: 騰沖萊西氏菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%
P-糖蛋白抑制劑多主葡萄座腔 阪崎腸桿顯色培養(yǎng)基(DFI瓊脂)CD8分子Elisa
非食用色堿性橙Ⅱ(王金黃)對(duì)照液 酵母浸粉c-fosElisa
可可里亞鎮(zhèn)鏈孢 K氏培養(yǎng)基C-反應(yīng)蛋白Elisa
果生鏈核盤(pán) FB2添加劑C肽Elisa
淺黃色芽胞八疊球 (S)-(+)-扁桃酸D-乳酸Elisa
半裸法氏殼 MFC肉湯I(xiàn)I型膠原蛋白Elisa
腐皮鐮孢 MFC瓊脂I型膠原蛋白Elisa
魯氏接合酵母 葡萄球選擇性瓊脂Na-K-ATPElisa
桃樹(shù)葉細(xì)性穿孔病* (1S,2S)-N,N'-雙[3-氧代-2-(2,4,6-三酰)亞丁基]-1,2-二苯基乙二P選擇Elisa
普通變形桿 亞硫酸鹽還原厭氧孢子液體培養(yǎng)基Toll樣受體2Elisa
多粘類芽孢桿 假單瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基/CN瓊脂Toll樣受體4Elisa
大杯蕈 金氏B培養(yǎng)基T亞群Elisa
頭孢霉 乙酰肉湯生化管α1酸性糖蛋白Elisa
微桿 1-溴芘α半乳糖基抗體Elisa
聚生殼 鈉氏試劑α干擾Elisa