詳細介紹
產(chǎn)品名稱:輔酶ⅡNADP(H)含量可見分光光度法
規(guī)格:50管/24樣
測試方法:可見分光光度法
分類:輔酶Ⅱ系列
貨號:GOY-01S6350
客戶自備儀器和試劑
商品介紹:
測定意義 輔酶ⅡNADP(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,NADP+和NADPH含量測定可以計算NADP(NADPH + NADP+ )含量和NADPH/NADP+比值,其變化與磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應密切相關(guān)。NADPH/NADP+比值不僅是細胞氧化還原態(tài)的主要標志之一,而且在PPP途徑、生物合成和抗氧化代謝中具有重要調(diào)控作用。 測定原理 分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NADP+和NADPH。NADPH通過PMS的遞氫作用,使氧化型噻唑藍(MTT)還原為甲瓚,570nm下檢測吸光值,從而測定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原NADP+為NADPH,從而檢測NADP+含量。 所需的儀器和用品 可見分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
實驗結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質(zhì)要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。
特點: 1、優(yōu)化設計的實驗方案,1小時即可完成 2、靈敏度高,操作便捷 3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑 | 儀器: 1、分光光度計/酶標儀(比色測定波長為550nm) 2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃) 3、臺式離心機 4、漩渦混勻器 5、微量移液器 |
樣品測定的準備:
1、細胞、細菌或組織樣品的制備 :
細菌或細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),棄上清;按照每100萬細菌或細胞加入1mL提取液,超聲波破碎細菌或細胞(功率20%,超聲3秒,間隔10秒,重復30次),之后置沸水浴振蕩提取10min;10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測。
組織:稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進行冰浴勻漿;之后置沸水浴振蕩提取10min,10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測。
2、血清(漿)樣品:取100μL血清(漿)加入1mL提取液,充分混勻,之后置沸水浴振蕩提取10分鐘,10000g,常溫離心10分鐘,取上清,冷卻后待測。
3、標準品的處理:稱取1mg,將標準品稀釋為15、10、8、6、4、2、1、0 μg/ml。
乙酰膽(ACH)試劑盒高香草草 ≥99.9999% (metals basis)參皂甙 Rc 分析標準品,>98%
乙酰膽(ACH)試劑盒高熊果酚苷四十八烷 Standard for GC,≥99.0% (GC)參皂甙 Rd 分析標準品,>98%
腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)試劑盒睪α-氧代-2-呋喃乙 97%參皂甙 Re 分析標準品,>98%
腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)試劑盒告達亭苷元奧美拉唑參皂苷Rh1 分析標準品,≥98%
角蛋白20(CK20)試劑盒戈米辛D對羥聯(lián)苯 分析標準品,用于環(huán)境分析參皂苷Rf 分析標準品,≥98%
角蛋白20(CK20)試劑盒戈米辛G棕櫚棕櫚酯 98%參皂苷Rb3 分析標準品,≥98%
β內(nèi)啡肽(β-EP)試劑盒戈米辛J棕櫚棕櫚酯 95%異正丁酯 98%
β內(nèi)啡肽(β-EP)試劑盒戈米辛N藍五號鈉鹽 80%乙異烯酯 99%
N端前腦鈉素(NT-proBNP)試劑盒格蘭地新聚(乙烯共聚馬來) Mw ~216,000 to ~80,000, powder印刷膠帶,用于封裝紙箱,60m*60mm*0.057mm
N端前腦鈉素(NT-proBNP)試劑盒格列苯脲四苯 99%2-氨-5-二苯 98%
前心鈉肽(Pro-ANP)試劑盒格列風內(nèi)酯軟脂 分析標準品,>99%(GC)2-氨-5-硝二苯 98%
前心鈉肽(Pro-ANP)試劑盒格列喹苯三化錫 分析標準品4-苯二苯 99%
角蛋白13(CK-13)試劑盒 格列齊特苯三化錫 98%二苯腙 98%
角蛋白13(CK-13)試劑盒 葛根素二二烯化銨/烯酰共聚物 10 wt. % in H2O4-二苯 99%
角蛋白17(CK17)試劑盒葛根素-6″-O-木糖苷對位紅 分析標準品,用于食品分析2-氨-5-二苯 99%
角蛋白17(CK17)試劑盒葛根素芹菜糖苷巖芹 分析標準品,>99%(GC)2--5-硝二苯 98%
輔酶ⅡNADP(H)含量可見分光光度法大鼠胸腺質(zhì)淋巴生成素(TSLP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒硝亞汞,二水 AR標準溶液容量分析用,0.1000mol/L
大鼠胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 硝亞汞,二水 GR碳鈉容量分析用溶液標準物質(zhì) 1/2Na2CO3:0.1000mol/L
大鼠胸腺表達趨化因子(TECK)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒鈉化氨汞 98%GC-ECD測試標準物質(zhì) 體-六六六:34.0ng/μL,:33.0ng/μL,
大鼠狀腺球蛋白(TG)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒鈉二氧化錳 GR,91%GC-FID測試標準物質(zhì) 300ng/μL
大鼠組蛋白脫乙酰(HDAC2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒異戊烯溴紅 AR正十六烷標準溶液100ng/ul溶劑:異辛烷,GC-TCD測試標準物
大鼠磷脂酰肌蛋白聚糖3(GPC3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 異戊烯溴紅 ACSICP光譜儀檢定溶液標準物質(zhì) 體:3%HNO3
大鼠組蛋白脫乙酰1(HDAC1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒異戊烯溴紅 IndicatorICP光譜儀檢定溶液標準物質(zhì)Cr、Ni、Zn:2.00ug/ml Cu、Ba、Mn:1.0
大鼠促狀腺素(TSH)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒二烯酰檸檬鎂 ARICP光譜儀檢定溶液標準物質(zhì)Cr、Ni、Zn:5.00ug/ml Cu、Ba、Mn:2.5
大鼠III型膠原α1(COL3α1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 二烯酰檸檬鎂 CPICP光譜儀檢定溶液標準物質(zhì)Cr、Ni、Zn:1.00ug/ml Cu、Ba、Mn:0.5
大鼠促狀腺胚胎因子(TEF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒二烯酰紫脲銨 ARICP光譜儀檢定溶液標準物質(zhì) (空白)
大鼠促狀腺素釋放激素(TRH)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒聚四氟乙烯樹脂紫脲銨 ACSICP光譜儀檢定溶液標準物質(zhì) 波長檢定用
大鼠狀腺素抗體(TAb)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒聚四氟乙烯樹脂紫脲銨 IND蔗糖水溶液標準物質(zhì) 蔗糖水10.1% ;質(zhì):水
大鼠狀腺素(T4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒聚四氟乙烯樹脂氫氧化鎂 Ultra pure,≥99.0% (KT)蔗糖水溶液標準物質(zhì) 蔗糖水30.3%;質(zhì):水
大鼠緊密連接蛋白1(TJP1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒4-氟-3-苯氟硅鎂 AR,99.0%蔗糖水溶液標準物質(zhì) 蔗糖水50.1%;質(zhì):水
大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒4-氟-3-苯氟硅鎂 CP,98.0%火焰光度計用標準物質(zhì) 體:0.1%鹽
大鼠組織因子(TF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒4-氟-3-苯硫汞 AR,99.5%紫外分光光度計溶液標準物質(zhì)體: 0.001mol/L HClO4
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。