公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:FAK自磷酸化抑制劑(Y15)
英文名稱:Y15
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Y15特異性抑制FAK自磷酸化。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:4506-66-5 別名:FAK inhibitor Y15;FAK Inhibitor 14 純度:98.0% 分子量:284.01 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
桃殼囊孢S100B蛋白多肽Anti-DUS2 Antibody人阿立新A(Orexin A)
小孢根霉華變種鈣結(jié)合蛋白S100A1抗原Anti-DUSP22 Antibody人阿立新A(Orexin A)
嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗原Anti-DUSP13 Antibody人神經(jīng)肽Y(NP-Y)
植物乳桿菌干生長因子抗原Anti-DUSP19 Antibody人神經(jīng)肽Y(NP-Y)
蘇云金芽孢桿菌九州亞種電壓開啟的鈉離子通道SCN9A抗原Anti-DUSP19 Antibody人腦腸肽(BGP/Gehrelin)
蕈狀芽孢桿菌CXC趨化因子14抗原Anti-DUSP4 Antibody人腦腸肽(BGP/Gehrelin)
皺狀假絲酵母CXC趨化因子16抗原Anti-DYNLRB2 Antibody人乙酰(ACH)
紡綞形賴芽孢桿菌臂板蛋白3A(多肽)Anti-DUSP9 Antibody人乙酰(ACH)
枯草芽孢桿菌臂板蛋白3F抗原Anti-DUSP4 Antibody人腦鈉/腦鈉尿肽(BNP)
慢生根瘤菌分泌型卷曲相關(guān)蛋白1抗原Anti-DYNLL2 Antibody人腦鈉/腦鈉尿肽(BNP)
解淀粉芽孢桿菌鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1抗原Anti-DYRK1A Antibody人角蛋白20(CK20)
淡紫擬青霉新朊蛋白/朊蛋白相關(guān)蛋白/沙杜(Shadoo)蛋白抗原Anti-DYSF Antibody人角蛋白20(CK20)
竹瘤座菌大腸桿菌志賀樣Ⅱ型突變體(O139菌型)Anti-ECI2 Antibody人β內(nèi)啡肽(β-EP)
榛色假單胞菌大腸桿菌志賀樣菌體蛋白(O139菌型)Anti-DZIP3 Antibody人β內(nèi)啡肽(β-EP)
纖細(xì)屈曲海生菌蛋白酪磷2抗原Anti-E2 J2 Antibody人N端前腦鈉(NT-proBNP)
毛束霉運(yùn)動神經(jīng)元存活蛋白結(jié)合蛋白1抗原Anti-ECI2 Antibody人N端前腦鈉(NT-proBNP)
同源盒蛋白HOXB13抗體深紅紅螺菌人乳頭狀卵巢腺癌細(xì)胞
蛋白激Cmu型抗體戊糖乳桿菌人皮膚鱗癌細(xì)胞
酪磷α抗體Sphingomonassanxanigenens人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞
受體型蛋白酪磷7抗體解淀粉芽孢桿菌人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞
FAK自磷酸化抑制劑(Y15)大豆慢生根瘤 異補(bǔ)骨脂色烯查耳酮
黑曲霉 Isoapetalic acid
葡萄酒假絲酵母 Isoaltholactone
枯草芽胞桿 Hydrangenol 8-O-glucoside
白地霉 荷茗草醌
巴豆油鑒別試液 千年健 A
棲酒窖共養(yǎng)單胞 Hierochin D
根瘤 六氫姜黃
pRL-TK (E)-阿魏酸二十六鹽
產(chǎn)氣腸桿定量標(biāo)準(zhǔn)株 鞭打繡球甙 A
菊池尾孢 Hedyotisol B
釀酒酵母 Goniodiol 7-acetate
節(jié)桿 五味子脂 M2
芽胞桿 算盤子酮
澳型核果褐腐病 靈芝 B