ROCK1和ROCK2小分子抑制劑(RKI-1447)公司正在出售的產(chǎn)品：IFN- Alpha(Mouse Interferon Alpha) ELISA Kit 小鼠α干擾硝鉛 AR，99%
Mouse rudimental bovine serum albumin check-up ELISA Kit 小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)鉛(II) ,三水 AR,99.5%
CA724(Mouse

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
耐冷冷桿菌Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗雞IgGAnti-TNFRSF10A Antibody防御β127(DEFβ127)

大馬勃生物標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFAIP1 Antibody防御β126(DEFβ126)

巨型艾美耳球蟲(chóng)Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFAIP8L2(TIPE-2) Antibody防御β125(DEFβ125)

玫瑰單胞菌Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF10B Antibody防御β124(DEFβ124)

鐮刀菌（大豆根腐病菌）Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF10B Antibody防御β123(DEFβ123)

蛹蟲(chóng)草Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF11A Antibody防御β121(DEFβ121)

乳桿菌屬PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF11A Antibody防御β119(DEFβ119)

pAAV-RC5PE-Cy7標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF11A Antibody防御β118(DEFβ118)

豬鏈球菌堿性磷（AP）標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF11A Antibody防御β116(DEFβ116)

布魯氏菌膠體金標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF11A Antibody防御β115(DEFβ115)

產(chǎn)克雷伯氏菌辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF11B Antibody防御β114(DEFβ114)

纖細(xì)海勒蒙氏菌FITC標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF13B Antibody防御β113(DEFβ113)

軟帕氏孔菌羅丹明標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF13C Antibody防御β112(DEFβ112)

毛地黃殼針孢Cy3標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF13C Antibody防御β110(DEFβ110)

楊奇青霉Cy5標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF14 Antibody防御β103B(DEFβ103B)

松口蘑Cy5.5標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF14 Antibody防御β103A(DEFβ103A)

蛋白激C亞型G抗體Hyphomonasrosenbergii人體結(jié)腸癌組織提取物

磷酯3蛋白抗體Ohtaekwangiakoreensis人體脂肪組織提取物

Rho鳥(niǎo)甘轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體壞死梭桿菌壞死亞種人體表皮組織提取物

中心粒周蛋白抗體谷棒狀桿菌（黃色短桿菌）人體胎兒真皮組織提取物
ROCK1和ROCK2小分子抑制劑(RKI-1447)釀酒酵母 6,8-二異戊二烯基柚皮

羊泰勒蟲(chóng)（臨潭株） 6-異戊二烯基柚皮

星狀雙歧桿 去甲黃腐

韋司梅擬盤(pán)多毛孢 蘇木酮A

藻瑚 7-甲氧基-beta-咔啉-1-酸

短桿 9-甲氧基鐵屎米酮 N氧化物

大豆慢生根瘤 9-甲氧基鐵屎米酮

鏈霉屬 鐵屎米酮 N氧化物

紅緣層孔 寬纓酮

馬昆德擬青霉 次苦參

鼠傷寒沙門(mén)氏 苦參N

叢毛單胞 苦參I

聚生殼 高車(chē)前 7-O-新橙皮糖苷

香菇 鴉膽子 D

盔蓋小菇 槐黃