MEK變構(gòu)抑制劑(TAK-733)公司正在出售的產(chǎn)品：cath-K/CK /FITC 熒光標(biāo)記組織蛋白K抗體IgG金屬鑭 99.5%,粉末
cath-L/CL /FITC 熒光標(biāo)記組織蛋白L抗體IgG氧化镥 99.99% metals basis
Cathepsin B/FITC 熒光標(biāo)記兔抗組織蛋白B抗體IgG金屬鑭 錠，99.5%
Cav-1/FITC 熒光標(biāo)記抗小凹蛋白抗體IgG镥

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

金頂側(cè)耳微白蛋白/細(xì)小清蛋白抗原Anti-DP-2 Antibody人神經(jīng)絲蛋白(NF)

炭疽芽孢桿菌酪酪肽多肽（1-36）Anti-DPP7 Antibody人神經(jīng)絲蛋白(NF)

淺灰白鏈霉菌Rad51抗原Anti-DPYSL2 Antibody人尿肽(KP)

蠟狀芽孢桿菌Rap1A抗原Anti-DPYSL2 Antibody人尿肽(KP)

淡青鏈霉菌維甲受體-β抗原Anti-DPPA4 Antibody人神經(jīng)降壓(NT)

大腸埃希氏菌Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗原Anti-DPYSL4 Antibody人神經(jīng)降壓(NT)

青藍(lán)馬杜放線菌抵抗抗原Anti-DPYSL4 Antibody人神經(jīng)激肽B(NKB)

毛霉屬G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗原Anti-DQX1 Antibody人神經(jīng)激肽B(NKB)

粘質(zhì)沙雷氏菌RhoA抗原Anti-DRD4 Antibody人強(qiáng)啡肽(Dyn)

大腸埃希氏桿菌RhoC抗原Anti-DROSHA Antibody人強(qiáng)啡肽(Dyn)

皺紋單胞菌環(huán)指蛋白148抗原Anti-DRD1 Antibody人腦啡肽(ENK)

基恩帚枝霉Rho相關(guān)蛋白激1抗原Anti-DROSHA Antibody人腦啡肽(ENK)

釀酒酵母Rho相關(guān)蛋白激2抗原Anti-DSG1 Antibody人γ肽(Pγ)

Bacillus methylotrophicus核受體RXRα抗原Anti-DUSP1 Antibody人γ肽(Pγ)

矩圓黑盤孢6-磷山梨脫氫抗原Anti-DTYMK Antibody人C型鈉尿肽(CNP)

小麥曲根霉S100B蛋白抗原Anti-DUS2 Antibody人C型鈉尿肽(CNP)

轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子MAZR抗體貝酵母人胃癌細(xì)胞（未分化）

淋巴細(xì)胞胞漿蛋白LCP1抗體白球擬酵母人食管鱗癌細(xì)胞

黑色瘤優(yōu)先表達(dá)抗原抗體沼澤紅假單胞菌小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞

磷脂C1樣蛋白抗體類球紅細(xì)菌(球形紅桿菌)人胰腺腺泡上皮癌
MEK變構(gòu)抑制劑(TAK-733)東北毛霉 里靈A

秦氏蜜環(huán) Lasiodiplodin

Bacillus atrophaeus 落葉松樹脂二甲

地衣芽孢桿 Lansiumarin C

雞傷寒沙門氏 四乙酸堪酯

渾濁紅球 Kadsurin A

糖化酵母 Juglanin

庫特氏屬 Isothymusin

新疆類芽孢桿 Isosativan

生脂固氮螺 Isomangiferolic acid

枯草芽孢桿 B 異野葛

月夜 異戈米辛 O

羊肚（不能訂購） 異柿醌

近綠曲霉 異木香酸

赭曲霉 Isoboonein