產(chǎn)品屬性:
中文名稱:TLR 7激動劑(GS-9620)
英文名稱:GS-9620
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
GS-9620是一種有效的選擇性的Toll樣受體(Toll-Like Receptor(TLR)7)激動劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1228585-88-3 別名:Vesatolimod 純度:98.78% 分子量:410.51 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
石椒草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside Rg2DNA結(jié)合蛋白C抗體包裝5g
石榴皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 20(R)Ginsenoside Rg3胃粘液抗體包裝100g
石榴皮鞣;安石榴林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside Rg3促黑激γ抗體包裝25g
石榴子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside Rh1抗體包裝1g
石杉堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside Rh2結(jié)腸癌相關(guān)蛋白MIC1抗體包裝5g
矢車菊-3-O-葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside Rh3組織相容性復(fù)合體β抗體包裝250g
使君子(使君子仁)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside RoMyc基因肺癌相關(guān)蛋白抗體包裝1g
首烏藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Myrislignan糖蛋白gp330抗體包裝5g
熟地黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cinnamyl alcohol磷化肌原調(diào)節(jié)蛋白抗體包裝1g
鼠尾草酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cinnamaldehyde造血祖激1抗體包裝5g
鼠尾草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: trans-Cinnamic acid絲裂原活化蛋白激MAP4K4抗體包裝1g
薯莨(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Daphnetin磷化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激結(jié)合蛋白1抗體包裝5g
薯蕷皂苷;重樓皂苷III(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sucralose磷化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激結(jié)合蛋白1抗體包裝1ml
薯蕷皂;薯蕷皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Notoginsenoside R1磷化絲裂原活化蛋白激3抗體包裝100g
雙氫(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Trifolirhizin磷化絲裂原活化蛋白激激2抗體包裝25g
乳桿菌Lactobacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品抗sp100抗體試劑盒丹參鈉;Sodium danshens
粉紅單端孢Trichothecium│roseum 質(zhì)量規(guī)格:>98%抗Smith抗體試劑盒丹酚B;Salvianolic aci
細(xì)腳擬青霉Paecilomyces tenuipes 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品抗Scl-70抗體ELISA Kit丹酚A;Salvianolic aci
TLR 7激動劑(GS-9620)質(zhì)金屬蛋白-17抗體滿山紅(標(biāo)準(zhǔn)品) Byakangelicol
膜突蛋白抗體蔓荊子黃(標(biāo)準(zhǔn)品) Byakangelicin
麻疹病融合蛋白抗體芒果苷(標(biāo)準(zhǔn)品) (?)-Bilobalide
紅膜蛋白55抗體芒果葉(標(biāo)準(zhǔn)品) Peucedanol
膜相關(guān)環(huán)指蛋白5抗體莽草(標(biāo)準(zhǔn)品) Cyclopamine
磷化肌增強(qiáng)因子2C抗體貓爪草(標(biāo)準(zhǔn)品) Betulin
線粒體核糖體蛋白MRP63抗體毛大丁草(標(biāo)準(zhǔn)品) Betulin
磷化肌增強(qiáng)因子2C抗體毛冬青(標(biāo)準(zhǔn)品) Betulinaldehyde
質(zhì)金屬蛋白13抗體毛冬青皂苷A Betulinic acid
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)