公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:topoisomerase抑制劑(Amsacrine)
英文名稱:Amsacrine
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Amsacrine是一種topoisomerase的抑制劑,能夠特異性抑制topoisomerase II,具有抗腫瘤的功效。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):51264-14-3 別名:AMSA;m-AMSA;CI-880;SN-11841;acridinyl anisidide 純度:99.98% 分子量:393.46 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
青霉菌FITC標(biāo)記的兔抗生物抗體IgGAnti-TIMP3 Antibody分離蛋白3(SCRN3)
少根根霉戴爾變種膠體金標(biāo)記的兔抗生物抗體IgGAnti-TIMP3 Antibody分離蛋白2(SCRN2)
東方纖細(xì)芽孢桿菌羅丹明標(biāo)記的兔抗生物抗體IgGAnti-TIMP2 Antibody分離蛋白1(SCRN1)
副溶血弧菌羅丹明標(biāo)記的兔抗牛IgGAnti-TIMP3 Antibody分揀連接蛋白9(SNX9)
副干酪乳桿菌堿性磷(AP)標(biāo)記的兔抗牛IgGAnti-TIMP4 Antibody分揀連接蛋白8(SNX8)
迂回殼囊孢PE-Cy7標(biāo)記的兔抗牛IgGAnti-TIMP4 Antibody分揀連接蛋白7(SNX7)
小麥斑鏈格孢膠體金標(biāo)記的兔抗牛IgGAnti-Tissue Factor(F3) Antibody分揀連接蛋白6(SNX6)
短密青霉生物標(biāo)記的兔抗牛IgGAnti-TIMP4 Antibody分揀連接蛋白5(SNX5)
海生嗜鹽球菌Cy3標(biāo)記的兔抗牛IgGAnti-TJP1 Antibody(PB0231)分揀連接蛋白4(SNX4)
中慢生華癸根瘤菌Cy5標(biāo)記的兔抗牛IgGAnti-TJP2 Antibody分揀連接蛋白3(SNX3)
白酒 錳 Cy5.5標(biāo)記的兔抗牛IgGAnti-TJP2 Antibody分揀連接蛋白2(SNX2)
芽孢桿菌Cy7標(biāo)記的兔抗牛IgGAnti-TJP3 Antibody分揀連接蛋白19(SNX19)
地衣芽孢桿菌PE標(biāo)記的兔抗牛IgGAnti-TJP3 Antibody分揀連接蛋白17(SNX17)
脲氣球菌PE-Cy3標(biāo)記的兔抗牛IgGAnti-TK1 Antibody分揀連接蛋白16(SNX16)
白布勒擔(dān)孢酵母PE-CY5標(biāo)記的兔抗牛IgGAnti-TLE5 Antibody分揀連接蛋白15(SNX15)
寡養(yǎng)單胞菌APC標(biāo)記的兔抗牛IgGAnti-TLN1 Antibody分揀連接蛋白14(SNX14)
磷激α1抗體Sphingobiumamiense人腎足突基底膜組織提取物
磷化激γ1Galbibactermesophilus人膀胱組織提取物
親環(huán)相關(guān)蛋白1抗體Sphingobiumscionense人腎小球組織提取物
磷化激γ2Cellulomonascarbonis人腎組織提取物
topoisomerase抑制劑(Amsacrine)Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum 衛(wèi)矛羰堿
葡萄座腔 地骨皮乙
枯草芽孢桿 白麻苷
葡萄痂圓孢 雷公藤新堿
金針菇FV908 30-羥基藤黃酸
寡孢鏈霉 9S-10alpha-羥基表藤黃酸
大理石奇異球 9R-10alpha-羥基表藤黃酸
尖頭蟲草 異藤黃酸
靈芝 新藤黃酸
黃楊痂圓孢 異新藤黃酸
異常威克漢姆酵母 藤黃酸
華根霉 2alpha-羥基-3beta-乙酰白樺酸
釀酒酵母 澤拉木
枯草芽孢桿 雷公藤酚A
土壤類芽孢桿 表沒食子兒茶3-O-(3''-O-甲基)沒食子酸酯