產(chǎn)品屬性:
中文名稱:ROCK2抑制劑(SLx-2119)
英文名稱:SLx-2119
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
英文名稱:SLx-2119 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg SLx-2119是一種有效的ROCK2抑制劑,IC50值為105nM,選擇性是ROCK1的200多倍,對(duì)ROCK1的IC50值為24μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):911417-87-3 別名:ROCK inhibitor;KD-025 純度:99.36% 分子量:452.51 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)黃鏈霉菌G基丁受體γ3/GABAA Rγ3抗體Human VAPB ELISA Kit猴超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)免疫試劑盒
水生鞘單胞菌G基丁受體ε/GABAA Rε抗體Human VAMP5 ELISA Kit猴補(bǔ)體片斷3b(C3b)免疫試劑盒
球孢白僵菌γ-基丁受體相關(guān)蛋白抗體Human VAMP4 ELISA Kit猴補(bǔ)體蛋白5(C5)免疫試劑盒
鏈霉菌G基丁A型受體θ/GABAA Rθ抗體Human VARS2 ELISA Kit猴白介6(IL-6)免疫試劑盒
米曲霉G基丁A型受體rho1 /GABAA Rρ1抗體Human VAMP7/TI-VAMP ELISA Kit猴白介2(IL-2)免疫試劑盒
水生屈曲桿菌G基丁A型受體rho2 /GABAA Rρ2抗體Human VANGL1 ELISA Kit猴白介1a(IL1A)免疫試劑盒
大孢子鏈霉菌G基丁B型受體結(jié)合蛋白抗體Human VAMP8 ELISA Kit猴γ干擾(IFN-γ)免疫試劑盒
Winogradskyella damuponensis 谷受體δ1/GluR-δ1抗體Human VANGL2 ELISA Kit猴β干擾(IFN-β)免疫試劑盒
茶云紋葉枯病谷受體相關(guān)蛋白1抗體Human UTP3 ELISA Kit猴β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)免疫試劑盒
輪枝菌(大豆胞囊線蟲(chóng)卵寄生真菌)環(huán)磷鳥(niǎo)苷門控通道蛋白CNG4抗體Human UTP6 ELISA Kit猴α干擾(IFN-α)免疫試劑盒
粘蓋牛肝菌*甘受體α1+甘受體α2抗體Human VAPA ELISA Kit猴slit同源物2(果蠅)(SLIT2)免疫試劑盒
巴斯德畢赤酵母甘受體α3/GlyR α3抗體Human UVRAG ELISA Kit猴E選擇(E-Selectin/CD62E)免疫試劑盒
釀酒酵母G蛋白偶聯(lián)受體C5家族亞型D抗體Human UTP23 ELISA Kit猴CD34分子(CD34)免疫試劑盒
青霉G蛋白偶聯(lián)受體18抗體Human UTP6 ELISA Kit猴B病(BV)免疫試劑盒
土曲霉G蛋白偶聯(lián)受體65抗體Human UTP3 ELISA Kit猴25羥基維生D3(25 HVD3)免疫試劑盒
腸膜明串珠菌生長(zhǎng)終止特異性同源盒基因抗體Human UVRAG ELISA Kit大鼠
火木層孔菌Phellinus│igniarius 質(zhì)量規(guī)格:藥用級(jí)藤苷H
輪蟲(chóng)弧菌Vibrio│rotiferianus 質(zhì)量規(guī)格:0.98野漆樹(shù)苷
發(fā)酵乳桿菌Lactobacillus│fermentum 質(zhì)量規(guī)格:≥98.0%百兩金A
ROCK2抑制劑(SLx-2119)聚生殼 2--4--3-蛋白磷酸2AElisa
土生類諾卡氏 2--4-吡啶巰基轉(zhuǎn)移Elisa
黑化鏈霉 2-氟-3--5-氟吡啶肌酐Elisa
辣椒枯萎 乙基三苯基溴化磷環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷Elisa
海水芽胞桿 敵草凝血Elisa
栗疫 (基膦)金基質(zhì)金屬蛋白2Elisa
金灰青霉 Fmoc-N-甲基-L-天冬氨酸 4-叔丁酯凝血Elisa
鴨疫里氏桿 N-(5-氨基-2-基)-4-(3-吡啶基)-2-氨基嘧啶基質(zhì)金屬蛋白2Elisa
禽腺病Ⅵ型 伊馬替尼碳酸酐Elisa
大球蓋菇 硫酸鉻,水合肺炎病抗體Elisa
根霉屬 十二羰基三釕基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1Elisa
亮白曲霉 化镥(III)六水合物, REacton基質(zhì)金屬蛋白9Elisa
米曲霉 (s)-4-(4-氨基芐基)-1,3-唑烷-2-酮白介27Elisa
磚紅鐮刀 1,1,1,5,5,5-六氟戊烷-2,白介16Elisa
米氏假單胞 4-MU-sulfate K *1 g* [4-Methylumbelliferyl sulfate鈣調(diào)蛋白Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)