商品介紹:
GSK2126458是一種高選擇性,有效的PI3K抑制劑,抑制p110α/β/δ/γ,mTORC1/2的活性,Ki值分別為0.019nM/0.13nM/0.024nM/0.06nM和0.18nM/0.3nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1086062-66-9 別名:Omipalisib 純度:99.31% 分子量:505.5 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PI3K抑制劑(GSK2126458)
英文名稱:GSK2126458
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
乳桿菌屬淺表層粘膜蛋白多糖抗體Human PCDH9 ELISA Kit羰基化蛋白(PC)
戊糖乳桿菌調(diào)控胚胎干分化蛋白Lhx2抗體Human PCDHA2 ELISA Kit羰基還原[NADPH] 1(CBR1/CBR/CRN)
馬紅球菌LRRC2蛋白抗體Human PBXIP1 ELISA Kit碳酐9(CA9)
微小根毛霉神經(jīng)突觸蛋白NGL3抗體Human PCBD1 ELISA Kit碳酐6(CA-6)
蟬花1-13(可訂)致盲基因LCA5樣蛋白抗體Human PCDHGC3 ELISA Kit碳酐3(CA3)
肺形側(cè)耳(鳳尾菇)致盲基因LCA5蛋白抗體Human PCF11 ELISA Kit碳酐2(CA-2)
假單胞菌屬轉(zhuǎn)錄因子LHX6抗體Human PCBD2 ELISA Kit碳酐2(CA2)
絨蓋干酪菌磷化腫瘤抑制基因LATS1/LATS2抗體Human PCBP2 ELISA Kit碳酐12(CA-12)
揚(yáng)奇青霉轉(zhuǎn)錄因子LBX1抗體Human ICTP(Cross-linked C-terminal opeptide of Collagen alpha-1(I) chain) ELISA Kit碳酐(CA)
里氏木霉神經(jīng)特異性轉(zhuǎn)錄因子LDB1抗體Human PCDH11Y ELISA Kit肽-主要組織相容性復(fù)合體復(fù)合物(pMHC)
香菇白化學(xué)吸引2抗體Human PCDH11X ELISA Kit肽酰脯酰異構(gòu)(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)
嗜線蟲致病桿菌LHX5蛋白抗體Human PCDHA3 ELISA Kit肽聚糖識(shí)別蛋白L(PGRP-L)
松口蘑單絲蛋白激1+2抗體Human PCDHA2 ELISA Kit肽聚糖(PG)
人參土地桿菌LIN7C蛋白抗體Human PCDH9 ELISA Kit肽基脯酰順?lè)串悩?gòu)(PPI)
富含亮重復(fù)序列Nogo受體反應(yīng)蛋白4抗體Human PCDHGB3 ELISA Kit胎球蛋白A(Fetuin A)
地衣芽孢桿菌富含亮α2糖蛋白抗體Human PBRM1 ELISA Kit胎球蛋白A(FETU-A)
灰黃青霉Penicillium│griseofulvum 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)人參皂苷Rh2
氣單胞菌Aeromonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)人參皂苷Rh1
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
PI3K抑制劑(GSK2126458)孟氏假單胞 三苯基鉍肌酐Elisa
綠粘帚霉 1,1'-聯(lián)-2-萘酚肌酐酸Elisa
黑曲霉 (R)-(-)-2,3-二氨基酸鹽酸鹽一氧化氮合成Elisa
短波單胞 對(duì)氨基水楊酸鈉脂肪Elisa
地衣芽孢桿 對(duì)氨基偶氮苯主要組織相容性復(fù)合體Elisa
土壤成對(duì)桿 三叔丁骨成型蛋白Elisa
枯草芽孢桿 2,3-戊二酮氨基酸Elisa
冷桿屬 4-肉桂抗壞血酸Elisa
葡萄座腔 D-(-)-泛酰內(nèi)酯Bcl2樣蛋白11Elisa
玉米大斑 N,N-二甲基乙一磷酸腺苷Elisa
鮑魚側(cè)耳 甲基脲谷氨酰半胱氨酸合成Elisa
農(nóng)藥殘留速測(cè)儀(農(nóng)卡) 4-溴-2-甲氧基苯c-Jun氨基末端激1Elisa
香菇 D-氨酸叔丁酯鹽酸鹽凋亡誘導(dǎo)因子Elisa
腐皮鐮孢 二巰基腺病1型Elisa
丁香暗黃鏈霉 2-苯并惡唑啉酮腺病2型Elisa