商品介紹:
Ixabepilone是一種microtubule抑制劑,能夠與微管蛋白結(jié)合,促進(jìn)微管蛋白的聚合和微管的穩(wěn)定,因此使細(xì)胞停滯在G2-M期,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:219989-84-1 別名:Azaepothilone B;BMS 247550;BMS 247550-1 純度:95.0% 分子量:506.7 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:microtubule抑制劑(Ixabepilone)
英文名稱:Ixabepilone
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
平菇2磷化增殖核多肽抗原Anti-DMGDH Antibody人活化A(ACV-A)
玫瑰單胞菌足特異蛋白抗原Anti-DMAP1 Antibody 人活化A(ACV-A)
鞘盒菌屬血小板源性生長因子-BB抗原Anti-DMGDH Antibody人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG-1)
泡盛曲霉胰十二指腸同源異型盒基因抗原Anti-DMPK Antibody人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG-1)
燼灰藍(lán)鏈霉菌果膠抗原Anti-DNAI2 Antibody人心鈉肽(ANP)
孢小克銀漢霉南變種肝癌高表達(dá)基因抗原Anti-DNAI1 Antibody人心鈉肽(ANP)
禾谷絲核菌腦啡肽Anti-DMTN Antibody人多巴D2受體(D2R)
光滑假絲酵母腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2/小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗原Anti-DMTN Antibody人多巴D2受體(D2R)
正青霉蛋白激R樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激抗原Anti-DNAJB1 Antibody人內(nèi)肽-2(EM-2)
嗜冷成對桿菌纖維束蛋白同源物1/肌動蛋白集束蛋白/圓線蟲紫癜 抗原Anti-DNAJB11 Antibody人內(nèi)肽-2(EM-2)
枯草芽孢桿菌胃蛋白原C蛋白抗原Anti-DNAJB11 Antibody人α-內(nèi)肽(α-EP)
瑞士乳桿菌過氧化物體增殖物激活受體γ輔激活子1α抗原Anti-DNAJC17 Antibody人α-內(nèi)肽(α-EP)
相思根瘤菌顆粒蛋白前體抗原Anti-DNAJB4 Antibody人抑制(INH)
豇豆慢生根瘤菌抑制/腫瘤抑制因子抗原Anti-DNAJC17 Antibody人抑制(INH)
土生類諾氏菌蛋白激A(多肽)Anti-DNM1 Antibody人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)
香菇尿激型纖溶原激活因子(多肽)Anti-DNAL4 Antibody人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)
蛋白激Cdelta結(jié)合蛋白抗體糖化酵母人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞
轉(zhuǎn)錄因子RPF1抗體爾斯伯酵母人彌漫性大細(xì)胞淋巴瘤B淋巴細(xì)胞
蛋白磷2A抑制劑1抗體滅酵母小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
橋粒相關(guān)蛋白DRS抗體粉狀畢赤酵母Walker氏癌肉瘤256瘤株
microtubule抑制劑(Ixabepilone)白僵 Prudomestin
香菇 Polygonal
達(dá)氏擬諾氏 Piperitol
耐熱鹽土生古 黃苦木B乙酸酯
雪白根霉 馬尾杉 C
Botryosphaeria obtusa Phenylalanine betaine
腐皮殼 Persicoside
葉際類芽孢桿 Paniculoside I
皮疽諾氏 圓錐定 A
枯草芽孢桿 奧沙京
歐文氏屬 Oplodiol
乳酸乳球 Oleuropeic acid 8-O-glucoside
香菇 Odoratone
鐮孢霉 Norlichexanthone
土黃滑銹傘 降阿賽里奧