詳細介紹
商品介紹:
4E1RCat能抑制eIF4E與eIF4G的相互作用及eIF4E與4E-BP1的相互作用,可抑制eIF4G和eIF4E的結(jié)合,IC50為3.2μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:328998-25-0 純度:98.20% 分子量:478.45 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:eIF4E與eIF4G的相互作用抑制劑(4E1RCat)
英文名稱:4E1RCat
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
Brenneria salicis小鼠抗血管內(nèi)皮生長因子A抗體Anti-MAOA Antibody(PB0704)色羥化2(TPH2)
黃白馬杜拉放線菌粘著斑蛋白抗體Anti-MAP2 Antibody色羥化1(TPH1)
黑青霉嗜鉻顆粒轉(zhuǎn)運蛋白VAT1抗體Anti-MAOB Antibody(PB0705)三葉因子3(TFF3)
耶納農(nóng)球菌維生D結(jié)合蛋白抗體Anti-MAP1LC3A Antibody三葉因子2(TFF2)
總狀毛霉血管非炎癥分子1抗體Anti-MAP2K2 Antibody三葉因子1(TFF1)
金黃隱球酵母血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體Anti-MAP2K1 Antibody三肽基肽Ⅰ(TPP1)
楊爛皮殼蕉孢菌血管內(nèi)皮生長因子C型抗體Anti-MAP2K3 Antibody三磷腺苷(ATP)
杰丁塞伯林德納氏酵母囊泡相關膜蛋白3抗體Anti-MAP2K3 Antibody三磷肌(IP3)
蘇云金芽胞桿菌空泡分選蛋白18抗體Anti-MAP2K3 Antibody基鳥苷合1(TGS1)
炭疽芽胞桿菌磷化波形蛋白抗體Anti-MAP2K4 Antibody三合蛋白(TRDN)
蘇云金芽胞桿菌達爾可他亞種磷化波形蛋白抗體Anti-MAP2K4 Antibody軟骨粘附(CHAD)
沙雷氏菌屬鳥苷轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體Anti-MAP2K7 Antibody軟骨糖蛋白39(GP39)
三葉草根瘤菌磷化鳥苷轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體Anti-MAP2K6 Antibody軟骨凝集蛋白(CHODL)
栗疫病菌磷化鳥苷轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體Anti-MAP2K6 Antibody軟骨關聯(lián)蛋白(CRTAP)
擬囊體側(cè)耳VWCE抗體Anti-MAP2K7 Antibody乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)
德氏乳桿菌德氏亞種牛痘病相關激1抗體(絲/蘇蛋白激VRK1)Anti-MAP3K1 Antibody絲抑蛋白(Maspin)
血清應答因子結(jié)合蛋白1抗體Rhizobacterdauci大鼠乳腺上皮細胞
頂端體相關蛋白7抗體Sphingomonaspolyaromaticivorans大鼠胰腺上皮細胞
14號染色體開放閱讀框174塞氏檸檬桿菌大鼠甲狀腺上皮細胞
分泌細胞凋亡相關蛋白1抗體Hyphomicrobiumzavarzinii大鼠胰島細胞
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短桿狀馬賽 蘆薈多糖黑濃集Elisa
擬莖點 藏紅花酸二黃體生成Elisa
阿舒假囊酵母 大豆異黃酮混合功能氧化Elisa
釀酒酵母 奧美拉唑肌苷酸Elisa
球孢白僵 ?;蛆Z脫氧膽酸鈉鹽肌酸激Elisa
香菇(林研6號) 磺舒敏感性脂肪Elisa
仁果叢梗孢 瑞鮑迪甙B甲狀腺Elisa
亮白曲霉 毛旋花子苷K堿性磷酸Elisa
膠孢 毛花苷C結(jié)合珠蛋白Elisa
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枯草芽孢桿 α-酮戊二酸精氨酸加壓Elisa
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