商品介紹:
BPO-27racemate是有效的CFTR抑制劑,IC50值為8nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1314873-02-3 純度:98.67% 分子量:548.34 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
大腸埃希菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體Human DEFB105(Beta-defensin 105) ELISA Kit人抑制βA(INHBA)免疫試劑盒
巨大芽孢桿菌中心體蛋白55kDa抗體Human CORT(Corticosterone) ELISA Kit人抑制B(INH-B)免疫試劑盒
地衣芽胞桿菌富含半胱與表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白2抗體Human PGRN(Progranulin) ELISA Kit人抑制A(INH-A)免疫試劑盒
謝瓦曲霉骨架相關(guān)蛋白2/腫瘤和微管相關(guān)蛋白抗體Human OxHDL(Oxidized high-density lipoprotein) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白R(shí)(hnRNP R)免疫試劑盒
草假單胞菌染色質(zhì)修飾蛋白4B(4C)抗體Human TUBA1B(Tubulin alpha-1B chain) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白P2(hnRNP P2)免疫試劑盒
弗氏鏈霉菌磷化非受體酪激c-Abl抗體Human CORT(Corticosterone) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白M(hnRNP M)免疫試劑盒
木菇屬磷化非受體酪激c-Abl抗體Human PGRN(Progranulin) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白L(HNRPL)抗體免疫試劑盒
瓜果腐霉磷化非受體酪激c-Abl抗體Human CAGE1(Cancer associated gene 1 protein) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白L(hnRNP L)免疫試劑盒
釀酒酵母酪蛋白激1γ2抗體Human CFHR2(Complement factor H-related protein 2) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白K(hnRNP K)免疫試劑盒
優(yōu)美氈被菌柯薩奇病蛋白受體B抗體Human DSP(Dentin Sialoprotein) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白I(hnRNP I/PTB)免疫試劑盒
黃色孢鏈霉菌腫瘤抑制因子FBW7抗體Human pro-ET1(Pro-endothelin 1) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白H(hnRNP H)免疫試劑盒
克羅諾桿菌屬粘附分子4抗體Human S100 Protein ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白G(hnRNP G)免疫試劑盒
嗜熱側(cè)孢霉鈣調(diào)蛋白結(jié)合轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體Human KCND3(Potassium voltage-gated channel subfamily D member 3) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白E(hnRNP E)免疫試劑盒
羅倫隱球酵母周期依賴性激5激活結(jié)合蛋白C53抗體Human PCOL-I(Procollagen I) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白D(hnRNP D)免疫試劑盒
開菲爾乳桿菌著絲粒蛋白H抗體Human FOXM1(Forkhead box protein M1) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白C(hnRNP C)免疫試劑盒
畢赤酵母半胱蛋白抑制劑6抗體Human TGT(tRNA-Guanine Transglycosylase) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A3(hnRNP A3)免疫試劑盒
棒狀桿菌Corynebacterium│ 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRI 型膠原蛋白試劑盒3-O-基沒食子
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRH-鈣粘著蛋白/H-鈣粘連蛋白試劑盒5-基-7-氧基異黃
副溶血弧菌Vibrio│parahaemolyticus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRHSP60 IgM抗體ELISA Kit5-基糠
CFTR抑制劑(BPO-27 racemate)扎魯司特英文名稱: Zearalenone from Giberella zeae磷化腺苷單磷活化蛋白激α2抗體包裝5g
扎托布洛芬英文名稱: Zinc carbonate basic蛋白酪磷1C抗體包裝25g
周效磺(磺多辛)英文名稱: Zinc distearate磷化蛋白酪磷1C抗體包裝5g
左羥英文名稱: Zinc hydroxide磷化蛋白酪磷1C抗體包裝1g
英文名稱: Zinc iodide磷脂酰肌激3催化亞單位3抗體包裝25g
佐米曲普坦英文名稱: Zinc phosphate tetrahydrate磷化磷脂酰肌激3催化亞單位3抗體包裝5g
佐匹克英文名稱: Zinc sulfide磷化磷脂酰肌激3催化亞單位3抗體包裝1g
(R)-9-[2-(二乙基磷酰氧基)基]腺嘌呤英文名稱: Zirconium (IV) oxide磷化蛋白激C theta抗體包裝5g
5'-O-(4,4'-二氧基三基)-N6-酰...英文名稱: Zirconium (IV) oxide chloride octahydrate磷脂酰肌激p85β抗體包裝1g
紅霉B英文名稱: Zirconium hydroxide hydrate磷化磷脂酰肌激p85β抗體包裝100g
(+)-5-反式前列英文名稱: α-(Trichloromethyl)benzyl acetate磷化蛋白磷2C亞型α抗體包裝25g
(+)-α-酚醋鹽英文名稱: Trimethylacetic acid三磷腺苷受體受體P2X2抗體包裝5g
(+)-前列英文名稱: Transfection Reagents-Biofection磷化樁蛋白Paxillin抗體包裝1g
(+/-)-4'-羥基硫心得安英文名稱: trans-Cinnamaldehyde多型性腺瘤基因1蛋白抗體包裝5g
(+/-)-4-羥基鹽心得安英文名稱: Fullerene C60 (pure)撲克蒙蛋白抗體包裝100g