ROCK激酶抑制劑(K-115)公司正在出售的產(chǎn)品：Hsp-60 ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白60氟化氫鈉 98%
MDA ELISA Kit 大鼠二正釩鈉 99.9%,60目
SOD ELISA Kit 大鼠超氧化物歧化正釩鈉 CP,98.0%
HSP gp96 ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白糖蛋白96正釩鈉 99.99% metals basis
CH50 ELISA Kit

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

煙芽孢桿菌TH糖蛋白抗體Anti-LY9 Antibody神經(jīng)鈣蛋白δ(NCALδ)

釀酒酵母紡錘體和著絲粒相關(guān)蛋白1抗體Anti-LYZ Antibody(PB0703)神經(jīng)蛋白聚糖(NCAN)

淡黃濕傘轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白3抗體Anti-MAD1L1 Antibody(PB0258)神經(jīng)(NEU)

球孢枝孢轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白1抗體Anti-MADCAM1 Antibody伸展蛋白(SNPH)

釀酒酵母病抑制蛋白Viperin抗體Anti-MAD2L1 Antibody攝食抑制因子1(NES1)

黃曲霉血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體Anti-MAdCAM1 Antibody上皮中性粒激活肽78(ENA78)

奇雄腐霉血管內(nèi)皮生長因子B167Anti-MAFA Antibody上皮性鈣黏附蛋白(CDHE)

奧氏蜜環(huán)菌血管內(nèi)皮生長因子BAnti-MAF Antibody上皮型脂肪結(jié)合蛋白(FABP5)

地衣芽孢桿菌01群稻葉型霍亂弧菌抗體Anti-MAFA Antibody上皮粘附分子(EPCAM)

云芝栓孔菌 (變色栓菌)血管抑制蛋白1抗體Anti-MAG Antibody上皮基質(zhì)相互作用蛋白1(EPSTI1)

多汁乳菇V5 tag標(biāo)簽抗體Anti-MAG Antibody上池蛋白(SBSN)

TardiphagaVSV-G tag標(biāo)簽抗體Anti-MAK Antibody殺傷凝集樣受體亞家族C成員2(KLRC2)

溶淀粉類芽孢桿菌血管內(nèi)皮生長因子抗體Anti-MAG Antibody殺傷凝集樣受體亞家族A成員1(KLRA1)

彎孢腺苷環(huán)化激活肽受體-II/血管活性腸肽受體-II抗體Anti-MAOA Antibody殺傷免疫球蛋白樣受體3DL1(KIR3DL1)

產(chǎn)紫青霉囊泡對接蛋白p115抗體Anti-MALT1 Antibody殺傷免疫球蛋白樣受體2DS4(KIR2DS4)

球孢白僵菌血管內(nèi)皮生長因子AAnti-MAOB Antibody殺傷蛋白(KLLN)

絲/蘇蛋白激Sgk3抗體致瀉大腸埃希氏菌大鼠卵巢顆粒細(xì)胞

轉(zhuǎn)錄因子sox9a抗體微桿菌屬大鼠卵巢成纖維細(xì)胞

清道夫受體B2抗體暗色環(huán)紋炭團(tuán)菌（斜面）大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞

應(yīng)激誘導(dǎo)磷蛋白1抗體Sphingomonaskoreensis大鼠淋巴成纖維細(xì)胞
ROCK激酶抑制劑(K-115)金龜子綠僵 硫酸鋅催乳Elisa

多正青霉 2,3-二氨基萘膽固7α羥化Elisa

Achromobacter insolitus  西米替汀低密度脂蛋白受體Elisa

立枯絲核 N-間氧基芐基-9順-油酸酰淀粉Elisa

雜色曲霉原變種 N-（3-甲氧基芐基）十六碳酰多巴Elisa

枯草芽孢桿 N-間氧基芐基-9順，12順-亞油酸酰芳香化Elisa

釀酒酵母 N-芐基-9順-油酸酰酚氧化Elisa

季也蒙畢赤酵母 瑪卡酰B睪酮Elisa

青黃馬杜拉放線 N-芐基-9順，12順-亞油酸酰谷氨酸脫氫Elisa

瘍殼孢屬 1-(2,6-二)羥骨鈣Elisa

芽胞桿屬 3-丁酸固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1Elisa

Bacillus tequilensis 鹽酸金霉果糖-1,6-二磷酸Elisa

大腸埃希氏 5-羥基色氨酸（5-HTP）果糖-6-磷酸激Elisa

黑曲霉 正癸酸過氧化物體增殖物激活受體αElisa

長柄平菇 醋酸潑尼松過氧化脂質(zhì);乳過氧化物Elisa