商品介紹:
GSK2830371是一種選擇性的Wip1磷酸酶(Wip1phosphatase)抑制劑,IC50為6nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1404456-53-6 純度:98.94% 分子量:461.02 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Wip1磷酸酶抑制劑(GSK 2830371)
英文名稱:Wip1phosphatase Inhibitor
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
污黑腐皮殼血小板源性生長(zhǎng)因子D(脊髓源性生長(zhǎng)因子B)Anti-AMD1 Antibody成纖維生長(zhǎng)因子6(FGF6)
卵形巴貝斯蟲(兩當(dāng)株)非典型蛋白激C特定相互作用蛋白抗體Anti-AMFR Antibody(PB1094)成纖維生長(zhǎng)因子4(FGF4)
釀酒酵母原鈣粘蛋白13抗體Anti-AMHR2 Antibody成纖維生長(zhǎng)因子21(FGF21/UNQ3115/PRO10196)
黑木耳 26S蛋白調(diào)節(jié)亞型抗體Anti-AMOTL2 Antibody成纖維生長(zhǎng)因子2(FGF2/bFGF)
橙黃色海球菌原鈣粘蛋白β11抗體Anti-AMH Antibody成纖維生長(zhǎng)因子13(FGF-13)
黃產(chǎn)色鏈霉菌軸周蛋白PRX抗體Anti-AMPK alpha 1/PRKAA1 Antibody成纖維生長(zhǎng)因子10(FGF10)
東海分枝桿菌豬藍(lán)耳病病GP5蛋白抗體Anti-AMY1A Antibody成熟促進(jìn)因子(MPF)
雞新城疫血凝抑制試驗(yàn)用陽(yáng)性血清(品)p21激活激1抗體Anti-AMY1A Antibody成骨生長(zhǎng)肽(OGP)
Edaphobacter sp.蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)抗體Anti-ANAPC2 Antibody巢蛋白1(NID1)
異常漢遜酵母脯酰羥化抗體Anti-ANG Antibody超氧化物歧化(SOD)
巨大芽胞桿菌抗豬瘟病抗體Anti-ANGPT1 Antibody超敏游離雌三(uE3)
秦氏蜜環(huán)菌胰脂肪相關(guān)蛋白1抗體Anti-ANGPT1 Antibody超敏生長(zhǎng)激(U S-GH)
黃孢平革菌蛋白質(zhì)磷2A亞基3抗體Anti-ANGPT1 Antibody超敏熱休克蛋白70(HSP-70)
假根蘑菇缺陷性分配同源物β抗體Anti-ANGPT2 Antibody超敏熱休克蛋白60(HSP-60)
枯草芽胞桿菌過氧化活化增生受體γ抗體Anti-ANGPT2 Antibody超敏前列腺特異性抗原(PSA-U S)
枯草芽孢桿菌中心粒蛋白抗體Anti-ANGPT2 Antibody超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)
酒香酵母Brettanomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
鏈孢菌屬Catellatospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Wip1磷酸酶抑制劑(GSK 2830371)薛瓦酵母 胰蛋白胨葡萄糖酵母浸膏肉湯(TGPY)乳房鏈球Elisa
擬青霉 1,2-雙(二甲基瞵)乙烷β干擾Elisa
亞螺毛殼 厭氧卵黃瓊脂基礎(chǔ)白介36αElisa
熒光假單胞 ATCC培養(yǎng)基:2693改良Dixon(mDixon)白介13Elisa
褐環(huán)粘蓋牛肝 UBA培養(yǎng)基饑餓Elisa
昆明新鞘氨 BF839計(jì)數(shù)選擇培養(yǎng)基β血小板球蛋白;β血栓環(huán)蛋白Elisa
毛紫褐鏈霉 2-氟-6-(三氟甲基)溴芐血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子AElisa
蘇云金芽孢桿松蠋亞種 M-Endo肉湯血小板激活因子乙酰水解Elisa
毛柄(金針菇) D-甘露發(fā)酵管(枯草芽孢桿)磷脂A2Elisa
擬青霉 N-Boc-N'-Cbz-L-賴氨酸可溶性CD14分子Elisa
異配囊接霉 酸鹽(枯草芽孢桿)脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白Elisa
腸桿屬 馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)分泌型卷曲相關(guān)蛋白5Elisa
植物乳桿植物亞種 CCFA瓊脂基礎(chǔ)磷酸化AKT蛋白Elisa
廣島鏈霉 大豆胰酪蛋白胨肉湯(含亞硫酸鐵)磷脂酰肌三羥基激Elisa
季也蒙假絲酵母 2-甲氧基茴香硫載脂蛋白EElisa