商品介紹:
LY2801653是一種II型ATP競爭性的MET酪氨酸激酶抑制劑,Ki為2nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1206799-15-6 別名:Merestinib 純度:99.71% 分子量:552.53 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:MET酪氨酸激酶抑制劑(LY2801653)
英文名稱:LY2801653
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
新疆鹽地桿菌線粒體脫偶連蛋白2抗體Anti-LIMK2 Antibody神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT4)
擴(kuò)展青霉線粒體脫偶連蛋白3抗體Anti-LIMK1 Antibody神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT3)
丁梭菌UBX結(jié)構(gòu)域域蛋白D2抗體Anti-LIF Antibody(PB0067)神經(jīng)型一氧化氮合(NOS1)
紅色蠟?zāi)⒎毫蝓?/span>L3抗體Anti-LMAN1 Antibody神經(jīng)酰激(CERK)
側(cè)孢短芽孢桿菌泛硫酯L1+3抗體Anti-LIN28A Antibody神經(jīng)纖維網(wǎng)蛋白2(NRP2)
大腸桿菌人狀瘤病E6相關(guān)蛋白抗體Anti-LIPC Antibody神經(jīng)纖維網(wǎng)蛋白1(NRP1)
膠孢泛蛋白連接Q1抗體Anti-LMNB2 Antibody神經(jīng)纖維2(NF2)
大腸埃希氏菌泛蛋白連接U抗體Anti-LMO1 Antibody神經(jīng)纖維1(NF1)
嗜假諾卡氏菌泛載體蛋白L6抗體Anti-LMO2 Antibody神經(jīng)黏附分子(NCAM)
禾谷鐮孢菌*泛激活2H抗體Anti-LONP1 Antibody神經(jīng)外營養(yǎng)蛋白4(NXPH4)
嗜乳桿菌泛蛋白連接G1抗體Anti-LMTK3 Antibody神經(jīng)外營養(yǎng)蛋白3(NXPH3)
棒曲霉泛蛋白連接E1抗體Anti-LOC134147/CMBL Antibody神經(jīng)外營養(yǎng)蛋白2(NXPH2)
枯草芽孢桿菌枯草亞種泛蛋白連接E3抗體Anti-LOC134147/CMBL Antibody神經(jīng)外營養(yǎng)蛋白1(NXPH1)
Marisediminicola泛蛋白連接2E2抗體Anti-LOX Antibody神經(jīng)突蛋白1(NRN1)
黃絮鱗鵝膏菌泛蛋白連接D4抗體Anti-LOXL2 Antibody神經(jīng)調(diào)節(jié)肽U受體1(NMUR1)
環(huán)狀芽胞桿菌泛蛋白連接D3抗體Anti-LOR Antibody神經(jīng)調(diào)節(jié)4(NRG4)
SET結(jié)合蛋白1抗體熱紫鏈霉菌大鼠腎上皮細(xì)胞
電壓門控鈉通道5α抗體巴氏生孢八疊球菌大鼠膀胱平滑肌細(xì)胞
沉默調(diào)節(jié)蛋白5抗體大腸桿菌BS-3234大鼠腎小管上皮細(xì)胞
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4增強(qiáng)因子抗體膿腫分枝桿菌大鼠腎足突細(xì)胞
MET酪氨酸激酶抑制劑(LY2801653)土曲霉 三氟化甲補(bǔ)體蛋白4Elisa
伯頓畢赤酵母 大豆油腫瘤壞死因子αElisa
大腸埃希 乙酰羥肟酸乙酯白介1βElisa
立枯絲核 三正辛色P4503A4Elisa
Pycnidiophora sp. 檸檬酸三丁酯碳酸酐Elisa
球孢白僵 氨基比林1,6-二磷酸果糖Elisa
大腸埃希氏 亞磷酸二乙酯17β羥類固脫氫Elisa
褐孢大禿馬勃 1-磷酸鞘氨Elisa
假單胞屬 凡士林3β羥類固脫氫Elisa
濃香乳菇 三氧化二5核苷酸Elisa
新鞘氨 碳化6-磷酸葡萄糖酸脫氫Elisa
枯草芽孢桿 海砂7-乙氧基-3-異吩惡唑酮-脫乙基Elisa
葡萄座腔屬 丁二酸酐核酸氧化8-羥基脫氧鳥苷Elisa
釀酒酵母 吩噻ATPElisa
木糖氧化無色桿 土耳其紅油I型膠原蛋白Elisa