公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:BMP抑制劑(DMH-1)
英文名稱:DMH-1
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
DMH-1是一種有效的,具有選擇性的BMP抑制劑,對(duì)ALK1/ALK2/ALK3/ALK6的IC50值分別為27/107.9/<5/47.6nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1206711-16-1 純度:99.65% 分子量:380.44 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
解脂假絲酵母解脂變種人CXC趨化因子受體3Anti-NFE2L3 Antibody人β羥丁(β-OHB)
假單胞菌屬小鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子Anti-NFKB1 Antibody人β羥丁(β-OHB)
枯草芽孢桿菌大鼠促性腺激釋放激受體抗體Anti-NFKB p65 Antibody人高密度脂蛋白膽固(HDL-C)
植物乳桿菌小鼠凋亡誘導(dǎo)因子Anti-NFKB2 Antibody人高密度脂蛋白膽固(HDL-C)
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌人γ干擾誘導(dǎo)蛋白16/p16Anti-NFKBIA Antibody人N端中段骨鈣(N-MID-OT)
哈茨木霉人基質(zhì)衍生因子1aAnti-NFKBIE Antibody人N端中段骨鈣(N-MID-OT)
釀酒酵母大鼠主要堿性蛋白Anti-NFKBIL1 Antibody人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6(LRP-6)
克勞氏芽孢桿菌小鼠堿性磷Anti-NFYB Antibody人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6(LRP-6)
韓國(guó)假單胞菌小鼠血管生成4Anti-NFRKB Antibody人低密度脂蛋白受體(VLDLR)
Enterobacter cloacae subsp. dissolvens大鼠嗜性粒陽(yáng)離子蛋白Anti-NFYA Antibody人低密度脂蛋白受體(VLDLR)
大腸埃希菌人淋巴趨化因子Anti-NFYB Antibody人低密度脂蛋白受體(LDLR)
球毛殼霉小鼠骨成型蛋白受體ⅡAnti-NFYB Antibody人低密度脂蛋白受體(LDLR)
甘肅姜成林氏菌大鼠鈣調(diào)磷Anti-NFYC Antibody人高密度脂蛋白(HDL)
桿狀毛霉人α干擾Anti-NHLH1 Antibody人高密度脂蛋白(HDL)
米曲霉大鼠白介33Anti-NID1 Antibody人αS轉(zhuǎn)移(α-GST)
桿菌人可溶性CD86Anti-NIBAN2 Antibody人αS轉(zhuǎn)移(α-GST)
環(huán)指蛋白34抗體盤(pán)長(zhǎng)孢狀刺盤(pán)孢人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞
環(huán)指蛋白21抗體#巴氏醋桿菌大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(未分化)
環(huán)指蛋白190抗體松根異擔(dān)孔菌人前列腺癌細(xì)胞(2013年新引進(jìn))(干細(xì)胞庫(kù)保藏)
環(huán)指蛋白123抗體鮑姆木層孔菌人白血病T淋巴細(xì)胞(干細(xì)胞庫(kù)保藏)
BMP抑制劑(DMH-1)燦爛類(lèi)芽孢桿 四甲基化
球形芽孢桿 四甲基化
玫瑰暗黃鏈霉 四甲基
咸海鮮芽孢桿 四乙基化
雞傷寒沙門(mén)氏 四乙基化
芽孢桿 四乙基
貝倫格葡萄座腔 四丁基
枯草芽孢桿 四庚基
小孢囊桿 棕櫚油酸甲酯
塵埃芽孢桿 對(duì)羥基酯
血痕韌革 對(duì)甲苯磺酸乙酯
紫色小單孢(絳紅小單孢)* 硬脂酸乙酯
釀酒酵母 癸二酸二甲酯
被孢霉屬 對(duì)苯二甲酸二甲酯
嗜線蟲(chóng)致病桿 鄰苯二甲酸二環(huán)己酯