產(chǎn)品屬性:
中文名稱:DAPK抑制劑(TC-DAPK 6)
英文名稱:TC-DAPK 6
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
TC-DAPK6是一種有效的ATP競爭性的選擇性DAPK抑制劑,作用于DAPK1和DAPK3,IC50分別為69和225nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):315694-89-4 別名:DAPK inhibitor 純度:95.0% 分子量:276.29 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
蠟狀芽孢桿菌泛結(jié)合E2蛋白A抗體Anti-LCN2 Antibody腎腫瘤抗原(RAGE)
美澳型核果褐腐病菌泛結(jié)合E2O抗體Anti-LCN2 Antibody腎小球蛋白(GLMN)
假臍菇泛蛋白連接J2抗體Anti-LCN2 Antibody腎損傷分子1(Kim1)
枯草芽孢桿菌泛蛋白連接M抗體Anti-LCN2 Antibody(PB0643)腎(REN)
肉色迷孔菌泛蛋白連接W抗體Anti-LCP1 Antibody腎上腺髓質(zhì)受體(AMR)
普利茅斯沙雷氏菌同源蛋白UNCX抗體Anti-LDHA Antibody(PB1129)腎上腺髓質(zhì)2(ADM2)
魯考弗美奇酵母UL16結(jié)合蛋白3抗體Anti-LDHB Antibody(PB1130)腎上腺能受體α2C(ADRα2C)
檸檬兩面神菌去泛化22抗體Anti-LEP Antibody腎上腺能受體α1A(ADRα1A)
深藍(lán)紫色桿菌RNA聚合I抗體Anti-LEP Antibody腎母瘤蛋白1(WT1)
根瘤菌尿鹽重吸收轉(zhuǎn)運(yùn)子1抗體Anti-LDLR Antibody腎(RNLS)
蘇云金芽孢桿菌肯尼亞亞種囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Use1抗體Anti-LEP Antibody腎連蛋白(NPNT)
Paecilomyces formosus上游結(jié)合蛋白1抗體Anti-LEP Antibody腎結(jié)核蛋白4(NPHP4)
福氏志賀氏菌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜蛋白UNC93B抗體Anti-LGALS1 Antibody腎膠原凝集1(CLK1)
金頂側(cè)耳神經(jīng)突起誘導(dǎo)因子受體UNC5B抗體Anti-LEPR Antibody腎胱7(NPHP7)
總狀共頭霉神經(jīng)突起生長誘導(dǎo)因子受體UNC5B抗體Anti-LEP Antibody腎胱5(NPHP5)
層出鐮刀菌神經(jīng)突起生長誘導(dǎo)因子受體UNC5D抗體Anti-LGALS1 Antibody型胱癥蛋白(CTNS)
肌脂蛋白抗體長雙歧桿菌嬰兒亞種大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
鞘激2抗體宋內(nèi)氏志賀氏菌大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
絲/蘇蛋白激3抗體紫色色桿菌(平板)大鼠心肌細(xì)胞
α維生E相關(guān)蛋白抗體光滑假絲酵母大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞
DAPK抑制劑(TC-DAPK 6)腫塊芽孢桿屬 金、鈀、鉑、銥、釕/Au, Pd, Pt, Ir, Ru磷脂A2Elisa
金黃殼囊孢 鋯、鉿、鎢、鉬、鉭、鈮、鈦/Zr, Hf, W, Mo, Ta, Nb, Ti腺苷單磷酸脫氨Elisa
米根霉 鋁、砷,、鋇、鈹、鉍、鎘、鈷、鉻、銅、鐵、鎵、鋰、鎂、錳、鎳、鉛、銻、錫、鍶、鈦、、釩、鋅/Al肉堿脂酰轉(zhuǎn)移Elisa
牛蛙假絲酵母 鋁、砷、鋇、鈹、鉍、鎘、鈷、鉻、銅、鐵、鎂、錳、鎳、銻、錫、鈦、釩、鋅、鋯/Al, As, Ba,肉堿脂酰轉(zhuǎn)移Elisa
圖拉爾正青霉 砷、銻、鉍、鉛、錫、鎘/As, Sb, Bi, Pb, Sn, Cd脂肪酸合成Elisa
棕黑腐質(zhì)霉 2,6-二甲氧基脂肪酸合成Elisa
季也蒙邁耶氏酵母 順-9-二十三烯肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移-ⅠElisa
固氮 辛可尼丁胃蛋白Elisa
樹脂殼 4-氟-3-苯胰蛋白Elisa
黃桿屬 聚四氟乙烯樹脂淀粉Elisa
云南木霉 二基基烯酰脂肪Elisa
蠟葉曲霉 異戊烯基溴磷脂A2Elisa
pET-39b 酸鈉磷脂CElisa
假單胞屬 酸磷脂DElisa
乳桿屬 苯甲硫磷脂A1Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)