蛋白激酶抑制劑(Staurosporine)公司正在出售的產(chǎn)品：TLR4/FITC 熒光標(biāo)記Toll樣受體4抗體IgGFmoc-L-纈氨 98%
TLR5/CD285 /FITC 熒光標(biāo)記Toll樣受體5抗體IgGFmoc-L-亮氨 98%
TLR6/CD286/FITC 熒光標(biāo)記Toll樣受體6抗體IgGFMOC-D-3-(2-吡啶)-氨 98%
TLR9/CD289/FITC 熒光標(biāo)記

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

球孢白僵菌克侖特羅/抗體Human α1-AT(Alpha 1-Antitrypsin) ELISA Kit人角蛋白18-M30(CK 18-M30)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌斯氏亞種6號染色體開放閱讀框151抗體Human α2-AP(α2-Antiplasmin) ELISA Kit人角蛋白18(CK-18)免疫試劑盒

秦氏蜜環(huán)菌15號染色體開放閱讀框52抗體Human αHSP(Alpha-Hemoglobin Stabilizing Protein) ELISA Kit人間粘附分子3(ICAM-3/CD50)免疫試劑盒

嗜鹽擬諾卡氏菌2號染色體開放閱讀框89抗體Human β-actin(Beta actin) ELISA Kit人間粘附分子2(ICAM-2/CD102)免疫試劑盒

瘦弱鹽扁平菌BCL10結(jié)合蛋白和激活核轉(zhuǎn)錄因子抗體Human ACP(Acid phosphatase) ELISA Kit人間粘附分子1(ICAM-1/CD54)免疫試劑盒

相思根瘤菌凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白15抗體Human MBP(myelin basic protein) ELISA Kit人性T淋巴相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)免疫試劑盒

美澳型核果褐腐病菌慢性淋巴白血病缺失基因6蛋白抗體Human SOCS4(Suppressor Of Cytokine Signaling 4) ELISA Kit人相關(guān)蛋白A(CagA)抗體(IgG)免疫試劑盒

米曲霉13號染色體開放閱讀框38抗體Human AA(Arachidonic Acid) ELISA Kit人相關(guān)蛋白A(CagA)免疫試劑盒

白僵菌14號染色體開放閱讀框140抗體Human VASPIN(Visceral Adipose Specific Serine Protease Inhibitor) ELISA Kit人凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白(PYCARD)免疫試劑盒

溶壁（lywallzyme）陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)樣蛋白2抗體Human VEGF165(Vascular Endothelial Growth Factor165) ELISA Kit人硒結(jié)合蛋白1(SELENBP1)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌15號染色體開放閱讀框62抗體Human VEGF-B(Vascular Endothelial Cell Growth Factor B) ELISA Kit人硒蛋白P(SEPP1)免疫試劑盒

美澳型核果褐腐病菌15號染色體開放閱讀框41抗體Human VIL1(Villin 1) ELISA Kit人戊型肝炎病抗體(IgM)免疫試劑盒

大腸埃希菌環(huán)核苷陽離子通道蛋白α2抗體Human VEGF-D(Vascular Endothelial Growth Factor D) ELISA Kit人戊型肝炎病抗體(IgG)免疫試劑盒

宋氏志賀氏菌鈣連蛋白抗體Human τPK1(Tau-Protein Kinase) ELISA Kit人戊糖(Pentosidine)免疫試劑盒

恥垢分枝桿菌二氫嘧啶相關(guān)蛋白2抗體Human TPA(Tissue Polypeptide Antigen) ELISA Kit人舞蹈病蛋白相互作用蛋白1(HIP1)免疫試劑盒

深綠木霉色P450ⅡE1抗體Human TPS(Tryptase) ELISA Kit人五聚3(PTX3)免疫試劑盒

綠色木霉Trichoderma│viride 質(zhì)量規(guī)格：>98%，BRDickkopf 3試劑盒格列喹

多粘類芽胞桿菌Paenibacillus│polymyxa 質(zhì)量規(guī)格：BRDickkopf 1試劑盒格列齊特

頂孢霉屬Acremonium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BCDicer-1 枸橘苷
蛋白激酶抑制劑(Staurosporine)葡萄座腔 3-溴-2-基吡啶整合αVβ3Elisa

厚白盤革 6-馬來酰亞丁酸整合連接激Elisa

黑腐皮殼 2-溴-3--5-酸正常T表達(dá)和分泌因子Elisa

球孢白僵 仲丁基酸脂蛋白aElisa

皺褶青霉 6-溴吡啶-2-酸頻哪酯脂蛋白磷脂A2Elisa

枯草芽孢桿 1,3-苯二酸脂蛋白脂Elisa

麥芽糖假絲酵母 4-正丁基苯酸脂多糖Elisa

大耳霉 4-正丁氧基苯酸脂多糖結(jié)合蛋白Elisa

弗雷德里克斯堡假單胞 4-頻哪酯脂多糖抗體Elisa

黑曲霉 4-(溴甲基)苯酸脂肪甘油三酯脂Elisa

巨型艾美耳球蟲 4-(芐氧基羰基)苯酸脂肪Elisa

堆形艾美耳球蟲 3-丁氧基苯酸脂肪酸合成Elisa

芽孢桿屬 3-丁氧基苯酸脂肪酸脫氫Elisa

樟疫霉 3-(溴甲基)苯酸脂褐質(zhì)Elisa

蘇云金芽孢桿日本亞種 聯(lián)酸新戊二酯脂聯(lián)Elisa