公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Akt活化抑制劑(Honokiol)
英文名稱:Honokiol
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Honokiol是Akt抑制劑,能夠抑制Akt的活化,同時(shí)能夠增強(qiáng)ERK1/2的磷酸化。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):35354-74-6 別名:NSC 293100 純度:99.71% 分子量:266.33 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
貝氏葡萄座腔菌人類狀瘤病18 E7抗體Human SBDS ELISA Kit貂
類產(chǎn)堿假單胞菌人類狀瘤病31 E7抗體Human SA1 ELISA Kit貂環(huán)磷腺苷(cAMP)免疫試劑盒
釀酒酵母轉(zhuǎn)錄因子HES2抗體Human SCAP ELISA Kit貂環(huán)磷鳥苷(cGMP)免疫試劑盒
居海綿溶桿菌轉(zhuǎn)錄因子HES3抗體Human SAPS3 ELISA Kit大象
毛柄金錢菌(金針菇)多磷肌激IPMK抗體Human SRGN(Serglycin) ELISA Kit大象孕激/孕(PROG)免疫試劑盒
黃色孢鏈霉菌IKK復(fù)合物相關(guān)蛋白抗體Human SARS2(Serine–tRNA ligase, mitochondrial ) ELISA Kit大象黃體激(LH)免疫試劑盒
總狀共頭霉IQSEC2抗體Human SAR1B ELISA Kit大象睪(T)免疫試劑盒
環(huán)圈鏈霉菌交叉蛋白2抗體Human SARM1 ELISA Kit大象促卵泡(FSH)免疫試劑盒
木犀青霉三磷肌苷焦磷抗體Human SASS6 ELISA Kit大象雌激(E)免疫試劑盒
葡萄球菌屬2,3-雙加氧抗體Human SART3 ELISA Kit植物
丁香假單胞菌白介19抗體Human SART1 ELISA Kit植物蔗糖磷合成(SPS)免疫試劑盒
馬來西亞鏈霉菌抑制A/Inhibin α抗體Human SARS2(Serine–tRNA ligase, mitochondrial ) ELISA Kit植物玉米核苷(ZR)免疫試劑盒
鮑氏桑黃胰島基因增強(qiáng)結(jié)合蛋白1/2抗體Human SAMD4B ELISA Kit植物乙(IAA)免疫試劑盒
黃曲霉磷化白介-1受體相關(guān)激1抗體Human SAMD9 ELISA Kit植物維生K1(VK1)免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌磷化白介-1受體相關(guān)激1抗體Human MVP(Major vault protein) ELISA Kit植物維生E(VE)免疫試劑盒
漢遜德巴利酵母磷化白介-1受體相關(guān)激1抗體Human S100A3 ELISA Kit植物維生D3(VD3)免疫試劑盒
嗜菌Acidiphilium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%9-氧基
ATCC33841=NCTC11330資源名稱: 弗氏弧菌 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,pestizides≤1 ppm2"-O-沒食子?;鸾z桃苷
茄匍柄霉Stemphylium│solani 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品大薊苷
Akt活化抑制劑(Honokiol)枯草芽孢桿 吲唑-4-酸 鹽酸鹽酪氨酸Elisa
漢遜德巴利酵母 6--2-己酮己糖激Elisa
蜻蜓蟲草 N-Boc-4-氧-L-脯氨酸甲酯磷酸果糖激Elisa
松口蘑(可訂購) N-Boc-順式-4-羥基-L-脯氨酸甲酯酮酸激Elisa
Bacillus methylotrophicus 偏硅酸鈉,五水脯氨酰羥化Elisa
猴頭 4-溴-3-甲氧檸檬酸合成Elisa
多主葡萄殼 乙酰酮鈹精氨酸代琥珀酸合成Elisa
葡萄座腔 BOC-D-苯甘氨基質(zhì)金屬蛋白7Elisa
糙皮側(cè)耳 4-溴-5-氟-2-甲酸基質(zhì)金屬蛋白13Elisa
變平滑假絲酵母 N-(3-磺基)-3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯鈉鹽基質(zhì)金屬蛋白7Elisa
*灰葡萄孢 3,5-二苯甲基質(zhì)金屬蛋白13Elisa
枯草芽胞桿 Arg-Phe acetate salt天冬酰酰羥化Elisa
考克氏屬 4--7-硝基-2,1,3-苯并氧雜惡二唑(NBD-Cl)胰高血糖樣肽1Elisa
水稻節(jié)桿 1,3-二(2-吡啶基)-1,3-二酮胃泌Elisa
果生鏈核盤 N,N-二仲丁基對(duì)苯二促胰液Elisa