USP7/USP47抑制劑(USP7/USP47 inhibitor)公司正在出售的產(chǎn)品：GMP-140(Mouse alpha-granular membrane protein) ELISA Kit 小鼠血漿α顆粒膜蛋白氫氟 AR,40.0%
MPO(Mouse myeloperoxidase) ELISA Kit 小鼠髓過氧化物氫氟 CP,40.0%
Gzms-B(Mouse granz

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

假單胞菌Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgGAnti-TFF3 Antibody鈣蛋白13(CAPN13)

干酪乳桿菌Alexa Fluor 555標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgGAnti-TFF3 Antibody鈣蛋白12(CAPN12)

根串珠霉Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgGAnti-TFPI Antibody鈣蛋白11(CAPN11)

樟疫霉PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgGAnti-TFPI Antibody鈣蛋白10(CAPN10)

大腸埃希氏桿菌堿性磷（AP）標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgGAnti-TFF3 Antibody鈣蛋白1(CAPN1)

芽孢桿菌FITC標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgGAnti-TFPI2 Antibody富酪蛋白(STATH)

腸膜明串珠菌腸膜亞種Cy3標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgGAnti-TFPI2 Antibody副腫瘤抗原MA2(PNMA2)

桑格利娜氏鏈霉菌Cy5標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgGAnti-TFRC Antibody復(fù)制啟動因子1(REPIN1)

假單胞菌Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgGAnti-TGFA Antibody復(fù)制蛋白A1(RPA1)

Sphingomonas fauciumCy7標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgGAnti-TFRC Antibody(PB0230)復(fù)合4(CPLX4)

韓國戴氏菌PE標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgGAnti-TGFB1(TGFβ1) Antibody復(fù)合3(CPLX3)

金針菇F2211PE-Cy3標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgGAnti-TGFBR2 Antibody復(fù)合2(CPLX2)

胞外多聚物鞘單胞菌羅丹明標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgGAnti-TGFBR1 Antibody復(fù)合1(CPLX1)

賽維瓦爾假單胞菌羅丹明標(biāo)記的兔抗親和Anti-TGFBR1 Antibody輔Q10同源物B(COQ10B)

紅緣層孔菌FITC標(biāo)記的兔抗親和Anti-TGFB2 Antibody輔激活因子激活因子(COAA)

根瘤菌堿性磷（AP）標(biāo)記的兔抗親和Anti-TGFBR1 Antibody輔肌動蛋白α4(ACTN4)

蛋白酪磷CD148抗體粗毛栓菌人關(guān)節(jié)軟骨組織提取物

磷甘油脫氫抗體糞產(chǎn)堿桿菌人成骨組織提取物

蛋白激Cnu型抗體涅氏小短桿菌人睪丸支持組織提取物

磷吡哆氧化抗體埃氏慢生根瘤菌人子宮頸組織提取物
USP7/USP47抑制劑(USP7/USP47 inhibitor)里氏木霉 羅漢果苷IIe

香菇* 柳杉酚； 10-脫氧代黃檜

靈芝(紅芝, 赤芝) 新隱丹參酮

黎巴嫩鏈霉紅色亞種 亞甲基丹參醌

黑木耳 6-羥基柳杉酚

長枝木霉 20-去氧鼠尾草酚

固氮 化失車菊-3-O-桑布雙糖苷

運(yùn)動節(jié)桿 槲皮3-O-葡萄糖酸苷

大腸埃希 化飛燕草-3-O-桑布雙糖苷

蠟?zāi)?/span> 化天竺葵-3,5-O-雙葡萄糖苷

光滑鱗傘 化天竺葵-3,5-O-雙葡萄糖苷

唐菖蒲伯克霍爾德 15-表-丹參 A

多黏類芽孢桿 丹參A

艾丁鹽盒 鼠尾草酮

灰略紅鏈霉 去氫丹參酮IIA