商品介紹:
GNE-140racemate是一個(gè)LDHA抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1802977-61-2 別名:GNE 140 racemate;GNE140 racemate 純度:99.53% 分子量:499.04 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):LDHA抑制劑(GNE-140 racemate)
英文名稱(chēng):GNE-140 racemate
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
板栗蛇孢日規(guī)殼LRRC59蛋白抗體Human PELI1 ELISA Kit拓樸異構(gòu)Ⅱ(TopoⅡ)
苜蓿中華根瘤菌LRRC41蛋白抗體Human CYP11A1(Cholesterol side-chain cleavage enzyme, mitochondrial) ELISA Kit脫氧皮質(zhì)(DOC)
日本根霉促黃體生成受體抗體Human PELI2 ELISA Kit脫氧尿三磷(DUTP)
美味側(cè)耳(紫孢側(cè)耳)乳清蛋白α抗體Human PFKFB2 ELISA Kit脫氧膠原吡啶交聯(lián)(DPD)
球孢白僵菌核纖層蛋白B2抗體Human PES1 ELISA Kit脫氧核糖核Ⅰ(DNase-Ⅰ)
金黃色葡萄球菌金黃亞種層粘蛋白α5抗體Human HCRTR1(Orexin receptor type 1) ELISA Kit脫氧吡啶啉(DPD)
白僵菌L-瓜抗體Human PEX1 ELISA Kit脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)
紅曲霉泌乳升高蛋白1抗體Human CYP11A1(Cholesterol side-chain cleavage enzyme, mitochondrial) ELISA Kit脫氫表雄硫酯(DHEA-S)
大腸埃希菌溶體相關(guān)膜蛋白4α抗體Human PEX11G ELISA Kit脫氫表雄S7(DHEA-S7)
亞細(xì)亞菌屬分化相關(guān)基因14抗體Human PDS5B ELISA Kit脫氫表雄(DHEA)
枯草芽孢桿菌β內(nèi)酰樣蛋白2抗體Human HCRTR1(Orexin receptor type 1) ELISA Kit脫-γ-羧基凝血原(DCP)
杏鮑菇神經(jīng)突觸粘附樣分子4抗體Human PDXDC1 ELISA Kit褪黑(MT)
膠孢可溶性半乳糖凝集3結(jié)合蛋白抗體Human PDSS2 ELISA Kit突觸泡蛋白抗體(SYP-Ab)
非無(wú)菌藥品 金黃色葡萄球菌(陽(yáng)性)瘦抗體Human PDE6C ELISA Kit突觸泡蛋白(SYP)
Flavobacterium磷脂磷酯LPIN1抗體Human PDZD2(PDZ domain-containing protein 2) ELISA Kit突觸回蛋白2(SYNJ2)
微紅微球菌G蛋白偶聯(lián)受體6抗體Human PDE7B(cAMP-specific 3′,5’-cyclic phosphodiesterase 7B) ELISA Kit透明質(zhì)(HAase)
小單孢菌屬菌種Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(N)紫丁香酚苷(五加苷B)
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質(zhì)量規(guī)格: >99.0 %(GC)五加皂苷B
沙門(mén)氏菌Salmonella│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)人參三
LDHA抑制劑(GNE-140 racemate)擬枝孢鐮孢 2,6-二-4-酚CD40分子Elisa
鏈孢囊 間苯甲酰纖連蛋白Elisa
食石蠟戈登氏 2-苯基-2-核心蛋白多糖Elisa
乳桿屬 4-氨基馬尿酸(PAH)高密度脂蛋白Elisa
產(chǎn)芽孢梭(生孢梭) 三乙基硅烷結(jié)核病γ干擾抗體Elisa
秀珍菇 2-氨基-4-酚鈉鹽敏感性脂肪Elisa
光滑鏈霉 DL-氨基二二甲吡啶酚Elisa
釀酒酵母 2-異氧基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜烷胰島樣生長(zhǎng)因子2Elisa
釀酒酵母 對(duì)甲苯磺酸炔酯孕酮Elisa
豬屎豆根瘤 亞*多殺性巴氏桿抗體Elisa
乙酸鈣不動(dòng)桿 1,1-硫代羰基二咪唑敏感性脂肪Elisa
枯草芽孢桿 檸康酐補(bǔ)體片段3bElisa
細(xì)鏈格孢 4-鄰二甲苯CD36分子Elisa
蠟狀芽孢桿 溴化1-辛基-3-甲基咪唑環(huán)氧化2Elisa
鉛黃腸球 2-苯血鈣Elisa