商品介紹:
英文名稱:Indoleamine-(2,3)-dioxygenase inhibitor 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg NLG919是一種有效的IDO(indoleamine-(2,3)-dioxygenase)抑制劑,Ki/EC50為7nM/75nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1402836-58-1 純度:99.92% 分子量:282.38 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
IDO抑制劑(NLG919) | Indoleamine-(2,3)-dioxygenase inhibitor | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
黃褐環(huán)銹傘谷酰1抗體Human TRPC4 ELISA Kit大鼠凋亡調(diào)節(jié)因子BAX(BAX)免疫試劑盒
約氏黃桿菌G蛋白偶聯(lián)受體GPR161蛋白抗體Human TRPA1(Transient receptor potential cation channel subfamily A member 1) ELISA Kit大鼠硒蛋白P(SEPP1)免疫試劑盒
榛色假單胞菌G蛋白偶聯(lián)受體GPR180蛋白抗體Human TSFM ELISA Kit大鼠戊糖(Pentosidine)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌G蛋白通路抑制物蛋白2抗體Human TSG101(Tumor susceptibility gene 101 protein) ELISA Kit大鼠五聚3(PTX3)免疫試劑盒
埃里希青霉G蛋白偶聯(lián)受體GPR177蛋白抗體Human TRPM6 ELISA Kit大鼠胃泌調(diào)節(jié)免疫試劑盒
Chitinophaga sancti G蛋白偶聯(lián)受體GPR89A蛋白抗體Human TSGA10 ELISA Kit大鼠胃泌(Gastrin)免疫試劑盒
雙孢蘑菇G蛋白偶聯(lián)受體GPRSP2蛋白抗體Human PDE10A(cAMP and cAMP-inhibited cGMP 3′,5′-cyclic phosphodiesterase 10A) ELISA Kit大鼠胃動受體(MTLR)免疫試劑盒
節(jié)桿菌屬G蛋白偶聯(lián)受體GPRC5C蛋白抗體Human TSGA13 ELISA Kit大鼠胃動(MTL)免疫試劑盒
秦氏蜜環(huán)菌G蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合蛋白α14/Gα 14 抗體Human TRPM8(Transient receptor potential cation channel subfamily M member 8) ELISA Kit大鼠胃蛋白(PG)免疫試劑盒
賈巴爾普爾毛殼G蛋白β樣蛋白抗體Human TRPS1 ELISA Kit大鼠維生K1(VK1)免疫試劑盒
哈茨木霉G蛋白β5/Gβ 5 抗體Human TRPT1 ELISA Kit大鼠維生E(VE)免疫試劑盒
炭黑曲霉G蛋白γ13/Gγ13 抗體Human TRMT5 ELISA Kit大鼠維生D結(jié)合蛋白(DBP)免疫試劑盒
海洋桿菌G蛋白γ5/Gγ5 抗體Human TSHZ3 ELISA Kit大鼠維生D3(VD3)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌G蛋白γ 1/Gγ 1 抗體Human TRMT6 ELISA Kit大鼠維生D2(VD2)免疫試劑盒
瑟氏泰勒蟲(成縣株)鳥嘌呤核苷結(jié)合蛋白2抗體Human TRNAU1AP/SECP43 ELISA Kit大鼠維生D(VD)免疫試劑盒
秦氏蜜環(huán)菌鳥嘌呤核苷結(jié)合蛋白3樣蛋白抗體Human TNFRSF6B(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 6B) ELISA Kit大鼠維生C(VC)免疫試劑盒
: ATCC11758資源名稱: 草分枝桿菌 質(zhì)量規(guī)格:40-60目,氣相、液相色譜柱絞股藍(lán)皂苷XLIX
木賊鐮刀菌Gibberella│intricans Wollenw. 質(zhì)量規(guī)格:60-80目,氣相、液相色譜柱棕櫚
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:80-100目,氣相、液相色譜柱連翹酯苷B
IDO抑制劑(NLG919)紫芝 4-羥基甲酯O-脫乙基Elisa
枯草芽孢桿 4-羥基苯乙芳基酰Elisa
鼠李糖乳桿 Fmoc-Cys(Pmeobzl)-OH木質(zhì)Elisa
美澳型核果褐腐病 3,5-二氟溴芐維生B1Elisa
土壤柔武氏 2-(叔丁氧羰基氨基)-維生B2Elisa
干酪乳桿 4--DL-苯氨酸甲酯鹽酸鹽維生B4Elisa
多主葡萄殼 L-4-苯氨酸維生B12Elisa
聚生殼 N-Boc-3-羥基氮雜環(huán)丁烷維生B13Elisa
疏毛盤多毛孢 決奈達(dá)隆鹽酸鹽維生B3Elisa
棕色固氮 1,3-雙(2,4,6-三基)化咪唑褪黑Elisa
光帽鱗傘 1,3-二均苯基咪唑-2-叉葡萄糖氧化Elisa
皮膚皮狀新絲孢酵母 2,3,4,6-O-四乙?;?beta-D-吡喃葡萄糖基異硫酸酯飽和脂肪酸Elisa
鞘氨桿屬 氘代氫化鋰鋁不飽和脂肪酸Elisa
擬枝孢鐮孢 雙(三苯基膦)二溴化鎳轉(zhuǎn)移Elisa
尖孢鐮刀 蓖麻油酸甲酯A型羧酸酯Elisa